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CO-IP后WB条带发光液发光后,膜变黄色

作者 玄玄子
来源: 小木虫 200 4 举报帖子
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这张是CO-IP后做WB发光后的膜,图片从左到右,前两个箭头分别是原液和孵育后上清目的条带的位置,第三个箭头所指是洗脱液上样,发现此条带与目的条带相比要偏小,怀疑为抗体轻链,但比25kd位置要大(图中25kd位置为maker带最下一条)。我的问题主要是:1,、发光后为什么膜会变黄?这样造成了 之后的曝光不出黑色条带,黄色部分曝光结果为“空洞‘’2、因为通过曝光前两条带的比较,发现原液与孵育后上清中目的蛋白相比,上清中含量要低不少,说明目的蛋白被沉淀下来了,那为什么洗脱液曝不出目的条带?目的条带位置以下的黄色部分又是什么?它为什么会变黄且曝出空洞的结果?求大神们帮帮忙分析分析!

CO-IP后WB条带发光液发光后,膜变黄色
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  • 精华评论
  • 那半句誓言

    之前普通wb也出现过这个问题 是因为蛋白量太多的原因 如果是轻链的话 建议降低孵育的IP抗议的量

  • 巩子汉

    1)出现你所谓的“空洞”,是因为发生了荧光猝灭现象,降低二抗浓度,减少曝光时间即可解决;2)黄色部分为曝光时氧化太过,原因如1),也可稀释显影液,

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