糖通常的问题就是没有保留，和没有响应
一般没有保留，可以用一些极性比较大的柱子，像你用的糖柱，氨基柱，或者hillic柱，也可以把羟基衍生了，走GC
没有响应：一把糖里面含有O，在低波长下面有时候有点吸收的，譬如195nm或者200nm等末端吸收，要是实在在紫外下面没有吸收，以前常用示差检测器，但是这检测器不稳定，建议用ELSD,或者质谱检测器，也是满不错的。

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Originally posted by oxygen7341 at 2010-11-20 21:50:05:
糖通常的问题就是没有保留，和没有响应
一般没有保留，可以用一些极性比较大的柱子，像你用的糖柱，氨基柱，或者hillic柱，也可以把羟基衍生了，走GC
没有响应：一把糖里面含有O，在低波长下面有时候有点吸收的 ...

谢谢！那像操作温度、流动相以及流速有什么要求没有呢？还是按照常规的就可以？

糖柱一般是氨基柱，由于氨基柱的键合相链非常短，不像C18柱那么长，所以会有流失，不建议使用质谱和ELSD等检测器，推荐使用时差折光检测器。

对于目前的几款大极性的柱子，键合的机械强度都不是很好，一般都是不能走高压的，我们都是根据要求看的，通常都不超过50bar。HILLIC柱分酸碱的，尽量选用在柱子范围内的PH值，我走hillic和氨基柱在elsd和ms检测器效果还可以，现在柱子没有想的那么脆弱。当然，你用一款柱子，你一定要事前看下这个柱子的极限条件，那样才好试。

引用回帖:

Originally posted by oxygen7341 at 2010-11-22 19:43:28:
对于目前的几款大极性的柱子，键合的机械强度都不是很好，一般都是不能走高压的，我们都是根据要求看的，通常都不超过50bar。HILLIC柱分酸碱的，尽量选用在柱子范围内的PH值，我走hillic和氨基柱在elsd和ms检测器 ...

还想请问下高手，你测糖的时候的操作条件是什么样的？就是比如柱温、液相、流速这些。我查了不少文献，他们用的hplc都是waters的，而且用的示差折光检测器，我不知道如果是不同型号的仪器，操作条件可不可以借鉴？
  呵呵，请高手解答啊，不甚感激！

引用回帖:

Originally posted by ccyw at 2010-11-24 20:05:08:


还想请问下高手，你测糖的时候的操作条件是什么样的？就是比如柱温、液相、流速这些。我查了不少文献，他们用的hplc都是waters的，而且用的示差折光检测器，我不知道如果是不同型号的仪器，操作条件可不可以借 ...

我们这里室温控制不好，而且我们样品需要走梯度，所以我们都少有用示差检测器的，仪器都是通用的啊，我这边waters和agilent的仪器为主，柱子用的是hillic，merck的柱，150*4.6mm*5um，流动相是A：10mM醋酸铵水溶液，B：乙腈
柱温：30度     流速：1.0ml/min
梯度是：
   T（min）:0         2         10        15
     B(%):   90        90        40        40
检测器：ms&elsd&200nm
hillic是一个出峰顺序是正相的，极性大的后出来，所以起始乙腈比较高，如果你糖在这个条件下面没有保留，那我想，在AQ柱上面应该能做的有保留的

[ Last edited by oxygen7341 on 2010-11-24 at 21:14 ]
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