肯定模板或引物有一个出了问题

不行换个酶试试

1，表达部位
你的cdna取的是什么材料什么部位的？或许你要的基因在这个部位根本不表达？换个部位试试？
2，用基因组做pcr扩基因
如果是过表达，那最后转录翻译都是一样的，如果是看定位什么的，就有差异了
3，换个模板
问师兄师姐师弟师妹还有其他实验室的战友们借一个吧，或者换个人给你p一下，全部用他的试剂，

你克的是什么？需不需要前期诱导再去提RNA？

你加个阳性对照，看看是不是cDNA不行