【求助/交流】关于转化拟南芥的问题
我用农杆菌介导的floral dip method转化拟南芥,现在已经转化出第一代了,要筛选第二代。
种子消毒处理方法为:70%乙醇1min;后用1倍的次氯酸处理10min。然后,在超菌工作台中把种子均匀地涂在MS培养基上。MS培养基加了抗生素Carb,和Kana,因为载体上有kana抗性。
都两周了,但为什么我筛的种子发芽了,但不长根呢?[/color]
谢谢大家!
[ Last edited by guanxn90 on 2010-12-26 at 19:36 ] 返回小木虫查看更多
今日热帖
或许这是表型。。。又或许是灭菌太严重了,我们用75%乙醇2min,100%乙醇+吐温10min就好了
抗生素浓度过高就会导致发芽不长根,所以也有可能是这个原因。
谢谢大家的回答。
现在总结如下:抗生素浓度过高可能会导致只发芽不长根;
消毒液浓度过高;
我的处理是:70%乙醇1min;9倍的次氯酸稀释成1倍的用+一点吐温10mins;然后用水洗,悬浮后涂在MS培养基上。
实验室的师兄说可能是因为涂过平板后,平板太干了,导致根长不进培养基了。
我想如果是有什么原因导致对种子有伤害的话,不至于只伤根不伤叶吧?
谢谢各位,
为什么加羧苄青霉素呢?
可以用10%双氧水5-10分钟消毒,效果很好