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【求助/交流】关于转化拟南芥的问题

作者 guanxn90
来源: 小木虫 300 6 举报帖子
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我用农杆菌介导的floral dip method转化拟南芥,现在已经转化出第一代了,要筛选第二代。

种子消毒处理方法为:70%乙醇1min;后用1倍的次氯酸处理10min。然后,在超菌工作台中把种子均匀地涂在MS培养基上。MS培养基加了抗生素Carb,和Kana,因为载体上有kana抗性。

都两周了,但为什么我筛的种子发芽了但不长根呢?[/color]

谢谢大家!

[ Last edited by guanxn90 on 2010-12-26 at 19:36 ] 返回小木虫查看更多

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  • 精华评论
  • wangying052

    或许这是表型。。。又或许是灭菌太严重了,我们用75%乙醇2min,100%乙醇+吐温10min就好了

  • 夜舞龙

    抗生素浓度过高就会导致发芽不长根,所以也有可能是这个原因。

  • guanxn90

    谢谢大家的回答。

    现在总结如下:抗生素浓度过高可能会导致只发芽不长根;
                  消毒液浓度过高;


    我的处理是:70%乙醇1min;9倍的次氯酸稀释成1倍的用+一点吐温10mins;然后用水洗,悬浮后涂在MS培养基上。

    实验室的师兄说可能是因为涂过平板后,平板太干了,导致根长不进培养基了。

    我想如果是有什么原因导致对种子有伤害的话,不至于只伤根不伤叶吧?

    谢谢各位,

  • A406

    为什么加羧苄青霉素呢?

  • yuanuancao

    可以用10%双氧水5-10分钟消毒,效果很好

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