启动密码子和终止密码子上下游1kb就可以。

不知道，高科技啊

通常1K左右就够了，当然多点通常也没啥坏处，不过要是取太多，不小心把上下游的其它ORF也取进来了就不好了，

不是很理解回补是什么意思，请教了。正在做干扰了，不过还没转化出来转化子了，暂时还检测不到。