想请教一下各位大神为什么毕赤酵母做菌落PCR会P不出来。
我用的方法是，直接从平板上挑取单菌落加入到5微升H20中，微波炉加热5分钟，之后做PCR，用了几种不同的引物，结果就是都P不出来，实在想不到是什么原因？想请问一下各位都是怎么做的？能P出来吗？
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菌挑的太多，模板量过高？
挑单菌落在50ul水，煮沸10min 后冰浴2min ，12000rpm离心1min,取1ul 上清作为模版进行PCR
可以吗？不加水的话，菌会不会烤干呀？
那PCR体系的跟普通PCR体系有什么不同吗
，
有挑的不多的，很少的也是P不出来。
我们也是永远p不出来，用的takara premix。后来换了家公司就ok了，你可以试试。