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Ni柱纯化蛋白双峰求助

作者 c269315986
来源: 小木虫 500 10 举报帖子
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请问各位兄弟姐妹,Ni柱纯化蛋白梯度洗脱时出现双峰,分不开,请问是什么原因?以前纯化时是50%洗脱液有单峰,最近纯化就成双峰了,30%,50%。

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  • 精华评论
  • 十四_14

    跑电泳看一下这两个峰的样品是否都含有你的目的蛋白

  • hc-material

    可以试试加大咪唑的浓度直接洗,跑电泳时一条带么

  • 十四_14

    引用回帖:
    3楼: Originally posted by c269315986 at 2017-05-17 11:19:25
    实验室只有SDS电泳,跑过了,两个峰都只有目的蛋白,但不清楚是单体还是多聚体,打算用分子筛看看。还是没搞明白为什么会变成双峰。
    ...

    恩可以考虑一下是不是蛋白结构发生变化

    另外  你的柱子用了多久?有时候柱子用久了也会影响纯化结果的

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