江湖救急!有没有做过pPIC9K载体克隆的大神,为什么我的克隆总是不成功呢? 酶切之后跑电泳,片段正常,为什么就是连接不上去呢?做了好几次转化,每次都是一个菌都不长,很是头疼呀!!望有经验的大神能帮帮我,不甚感激! 返回小木虫查看更多
你是怎么确定酶就一定把你的目的基因给切开的那?
你用的是哪两个酶切位点
你是怎么确定酶就一定把你的目的基因给切开的那?
不是质粒,是PCR产物的目的片段。
你用的是哪两个酶切位点
我做过这俩位点的克隆,很顺利,你的问题主要是不长单克隆,你先转一个空载体pPIC9K到大肠杆菌,看能不能长出单克隆。(验证载体无误)
,