qPCR四个目的基因p出来了但内参18s P不出来,请问什么原因??
两幅图分别是提取真菌中总RNA电泳图,和QPCR结果(t处理,ck对照)。可以看出目的基因已经出现有ct值,但是内参18s没有测出。处理组RNA浓度,200多ng/ul和80多ng/ul,对照是60多ng/ul,A260/A280 2.1左右。提取后直接-80度保存一个多星期在反转录使用。不知道为什么内参基因P不出??求解
d8 la处理和ck 总RNA.jpg
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是的 用的是试剂盒mix
用Novo试剂盒 两步法 显示RNA和无酶水共10ul 65度五分钟 然后加10ulmix 42度 1h 72度5min
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反转录的引物加400ng 左右
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先普通PCR看看内参基因能不能跑出来