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qPCR四个目的基因p出来了但内参18s P不出来,请问什么原因??

作者 上官海泠
来源: 小木虫 450 9 举报帖子
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两幅图分别是提取真菌中总RNA电泳图,和QPCR结果(t处理,ck对照)。可以看出目的基因已经出现有ct值,但是内参18s没有测出。处理组RNA浓度,200多ng/ul和80多ng/ul,对照是60多ng/ul,A260/A280 2.1左右。提取后直接-80度保存一个多星期在反转录使用。不知道为什么内参基因P不出??求解

qPCR四个目的基因p出来了但内参18s  P不出来,请问什么原因??
d8 la处理和ck 总RNA.jpg


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  • 精华评论
  • 上官海泠

    引用回帖:
    2楼: Originally posted by oylb at 2017-04-22 18:37:43
    反转录方法?oligodT反转吗?

    是的 用的是试剂盒mix

  • 上官海泠

    引用回帖:
    2楼: Originally posted by oylb at 2017-04-22 18:37:43
    反转录方法?oligodT反转吗?

    用Novo试剂盒 两步法 显示RNA和无酶水共10ul 65度五分钟 然后加10ulmix 42度 1h 72度5min

  • 上官海泠

    引用回帖:
    2楼: Originally posted by oylb at 2017-04-22 18:37:43
    反转录方法?oligodT反转吗?

    反转录的引物加400ng 左右

  • cxh90

    先普通PCR看看内参基因能不能跑出来

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