聚丙烯酰胺凝胶电泳染色问题,有图
本科毕业实验,由于是第一次做,结果不行但是找不到问题所在,求各路大神解答
变性加样缓冲液: 0.5%溴酚蓝,98%去离子甲酰胺,2%甘油,10mM EDTA
聚丙烯酰胺凝胶染色:固定液:10%无水乙醇 ;氧化液:1%硝酸;染色液:0.2%硝酸银(500ml+200ul甲醛);显色液:3%碳酸钠(500ml+100ul甲醛+100ul硫代硫酸钠)
电泳时间200V 3.5h;
不知道是不是电泳时间不够,但我看溴酚蓝都快要到底了才取出来的。marker都跑出来了,其他的看不清楚。
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你的protocol不行,换一个。
在把电流从50mA提升到100mA后,同样的时间出了这张图。是不是还可以把电流稍稍增大,或是时间再延长一些?
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不用固定,用0.1%的硝酸银染色10分钟,然后用1%的氢氧化钠加1%的甲醛显色试下,
我的是6%的胶,170V电泳1.5-2个小时