条带很弥散是为什么？
三种pcr产物。胶浓度0.8，目的条带大小6700。
由于引物GC含量很高，所以退火温度不知道如何会比较好，P了好几次都弥散。
样品1：86，79
样品2:80,79
样品3:83,84
（引物的Tm值）
求助PCR程序怎么设置。
或者知道这个图是什么原因造成的
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你肯定是没扩出来的
退火温度要那么高吗？我的引物也是七八十度，但我每次都用60度跑，是能跑出来的。
是不是模板浓度太高了
退火温度56到60之间就可以，胶浓度可以用1，95，10min，95℃30s，56或60℃50s72℃7min，30个循环，72℃10min试试
试neb的Q5没？
降低退火温度，减少循环数试试
请教一下，我引物Tm值都在70多度，为什么退火温度还是设置的那么低？不是比Tm值低3-5度吗
，