目的基因连接至pet28a,转化至大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,但是无论怎么优化诱导条件,蛋白都是以包涵体形式存在。应该怎么做才会得到可溶性蛋白呢? 返回小木虫查看更多
变GST融合蛋白。。。。。。。连PGEX-4T-1
楼主你和我一样,我最近也是蛋白表达都是包涵体,也没有找到解决办法,如果你解决了的话我们可以探讨一下
低温诱导表达
我能说一下么,老师讲的一个例子,她师妹的导师讨厌包涵体,但是给了她一个载体,让他做条件优化,大半年了,都是包涵体,然后发现,这个载体就是为包涵体表达而设计的,还有你这个载体的宿主匹配么。 ,
建议你查一下这个载体,我觉得它就是为包涵体而设计的
外源蛋白本身就容易表达成包涵体,可以做下疏水性预测,越疏水越易行成包涵体。可以尝试低温诱导,低转速,改变培养基条件,或者换gst吧
包涵体可以复性,别折腾了,根据你的实验目的考量
变GST融合蛋白。。。。。。。连PGEX-4T-1
楼主你和我一样,我最近也是蛋白表达都是包涵体,也没有找到解决办法,如果你解决了的话我们可以探讨一下
低温诱导表达
我能说一下么,老师讲的一个例子,她师妹的导师讨厌包涵体,但是给了她一个载体,让他做条件优化,大半年了,都是包涵体,然后发现,这个载体就是为包涵体表达而设计的,还有你这个载体的宿主匹配么。
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建议你查一下这个载体,我觉得它就是为包涵体而设计的
外源蛋白本身就容易表达成包涵体,可以做下疏水性预测,越疏水越易行成包涵体。可以尝试低温诱导,低转速,改变培养基条件,或者换gst吧
包涵体可以复性,别折腾了,根据你的实验目的考量