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蛋白质SDS-PAGE的分离胶不能跑到尽头,一直在上游

蛋白质一直跑不下来,一到分离胶中游就不动了,电压,浓缩胶40,分离胶60-80。本人多次做实验,药品也更换了好多次,每次都这个结果。看过好多帖子,也没注意到有我这种情况的。还有就是压不成一条线,中途分成两条线了。我现在推测可能是胶凝的不好,分离胶是30s左右开始凝固,再静止30min,浓缩胶5-8min开始凝固,静止1h.各位大神和做过相关的,有啥建议指点指点小弟

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用户评论

你跑胶的电压也太小了吧 ,100v跑分离胶,还有你的电泳装置可能漏液导致电压上不去

换一个aps试试

电极缓冲液也可能不正常

4楼: Originally posted by dongmings at 2017-03-18 22:52:22
换一个aps试试
过硫酸铵应该只是催化剂,是通过影响胶的凝结速度导致的嘛?那正常胶的凝结速度应该是多少?

2楼: Originally posted by pf790352975 at 2017-03-18 22:47:52
你跑胶的电压也太小了吧 ,100v跑分离胶,还有你的电泳装置可能漏液导致电压上不去
那只把分离胶的电压调了,浓缩还40v跑,不过我一直调到80v电压都能上去,再高就没试过了,还有我新跑的胶用的ladder做标准品,染色和刚开始染色后ladder并没有条带?是ladder不能做标准品嘛,跑的时候还看到ladder跑下去了,

5楼: Originally posted by dongmings at 2017-03-18 22:53:21
电极缓冲液也可能不正常
电极缓冲液我是用tris1.5g,甘氨酸7.2g,SDS是0.5g定容500mL

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