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求教HPLC一系列~新手小白摸条件中,各种不明白

做的是中药复方的指纹图谱,乙腈和水梯度洗脱,可是下图中基线漂的太厉害了。是我梯度出问题了麽。还是流动相需要改变呢?求各种指点咯。(?>?<?)
求教HPLC一系列~新手小白摸条件中,各种不明白

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用户评论

考虑过自己梯度的问题。可是不知应该怎么改。:shuai::shuai:

好像很多东西没分开呀。供试品制备,流动相啥的,慢慢来呗

3楼: Originally posted by huaruishi at 2017-03-18 19:55:56
好像很多东西没分开呀。供试品制备,流动相啥的,慢慢来呗
前面到45分钟是不是基线漂移?还是因为前面都没分开?之前用甲醇和水作为流动相,也不理想。我根据我之前得的色谱图,把流速改到0.7  前面洗脱时间拉长,比例没变后得到那个图,还有就是不咋清楚咋修改极性。如果峰没分开,是不是应该时间拉长或者流动相的比例极性减小,让后面的峰慢点出来呢,

不知道你的水相里有没有加酸,检测波长短的话,建议不要用甲酸,用0.1%磷酸。

5楼: Originally posted by 懒虫红岩 at 2017-03-18 20:48:33
不知道你的水相里有没有加酸,检测波长短的话,建议不要用甲酸,用0.1%磷酸。
水相里面没有加酸。加磷酸是为了修饰峰形麽。我这色谱图还有的救麽

0.5流速试试

这个不像是漂移,漂移很多是发生在后面的。更像是前面的东西很多没有分开,很多个峰叠在一起了。首先把乙腈的比例调小,你这个大极性的东西太多,最好先用30-40%的乙腈试试,当然时间要延长。

好的。多谢指点,我周一的时候试试。之前乙腈用的是纯乙腈  那我水里要加点磷酸麽~~

8楼: Originally posted by bleach-bin at 2017-03-18 22:20:12
这个不像是漂移,漂移很多是发生在后面的。更像是前面的东西很多没有分开,很多个峰叠在一起了。首先把乙腈的比例调小,你这个大极性的东西太多,最好先用30-40%的乙腈试试,当然时间要延长。
好的。多谢指点,我周一的时候试试。之前乙腈用的是纯乙腈??那我水里要加点磷酸麽~~

11楼: Originally posted by Yao47 at 2017-03-19 11:47:08
冲柱子3天
你意思是柱子有问题?

如果你用的是旧柱子的话

13楼: Originally posted by Yao47 at 2017-03-19 13:07:22
如果你用的是旧柱子的话
柱子倒不是旧的。那你看我上面的图,是基线漂移呢还是峰没分开呢

把梯度放上来 看看

10楼: Originally posted by 玖月一号 at 2017-03-18 22:48:20
好的。多谢指点,我周一的时候试试。之前乙腈用的是纯乙腈??那我水里要加点磷酸麽~~
...
和酸有什么关系?一般是化合物有较强酸性或碱性时会导致拖尾,这时才要加弱酸或弱碱调节峰形,你这个自己看有没有需要吧

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