抗氧化实验,DPPH,ABTS等实验问题,请各位请教
在做DPPH实验中,参考文献中都提到,需要对所做样品溶液进行稀释,我见到参考文献是柑橘,其中选用几个不同品种的柑橘,然后对不同品种的溶液进行了不同倍数的稀释,在这里对样品稀释有何意思,依据是什么?有一种说法是吸光度最好在0.3~0.7之前,在0.434时候最准确,那么,对不同柑橘品种稀释了不同倍数就是为了符合在准确吸光度的范围吗?比如稀释后,所得吸光值都在0.434这个吸光度范围内,然后又统一在517nm下测值, 那么这个所得数据有什么意思?或者是因为别的?另外还有一个问题是:用trolox做标准曲线,得到方程后,这个方程有什么用,Y=3.583x-1.014,R2=0.999,这么一个方程,是不是在得到样品吸光度后,以Y带入,以求得X值?因为我做了多次trolox的测定,所得方程有一定区别,详细问一下
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没有人吗,新人,没有金币啊
没有人呢
楼主,想请问一下,你制作标曲时,trolox的系列浓度是多少
这里第一个问题样品稀释问题,比如一般DPPH抗氧化实验如果采用维C做对照,当你和样品同样1:1加入DPPH醇溶液时,维C组OD值非常低,DPPH清除率会高于你的样品,不在你的方程线性范围内,做出来的结果毫无意义,这就是样品会根据OD值调节稀释倍数的原因
第二个问题,其实仍然是第一问题,酶标仪的测OD值一般都认为0,2-1.2这范围数据较为准确,要求更为严格的会缩小这个范围,但不会像你说的到某一个值,比如当你的od值超过1,拟合出来的曲线和你实际的DPPH清除率差异非常大,这就是超出线性范围的结果
第三个,你仔细看下你的曲线y轴是清楚率值,你带人的应该是A1,A2你的表述有问题,带入后才能得到方程,
楼主你好,我也在做这个抗氧化,遇到用VE计算抗氧化当量时不理解怎么计算,求指教