WB试验中，内源性蛋白能出条带，带tag的出不来条带
最近在做WB，我在HEK-293T中转染带tag的目的质粒后，用提取的蛋白跑WB，
结果总是用特异性抗体的有条带，但是用anti-Tag的抗体没有条带，
被这个问题困住了两三个月了，实验也没法往下进行。
把详细操作步骤跟老板对过了，老板也觉得没问题，他也想不出问题出在哪里，要愁死了。
有人遇到过这种情况吗？
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我也是，而且我的特异性抗体杂带多，没办法判断结果啊
我也遇到过这种情况，我觉得只能把标签换一下位置，C端和N端都试试，可能是由于你的蛋白的某一端的结构将标签包裹，而不能暴露标签的结合位点造成的，
没有表达吧，要么转染效率太低，要么表达效率太低
是不是houzahui构建载体的时候没有去掉终止密码子？
我也是，ha tag始终做不出来
没表达，要么抗体有问题
你什么tag，先确定能不能表达。。