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PCR时条带很单一(1.8k),切胶回收后,出现两条带(1.8k,1k)

作者 含羞草liu
来源: 小木虫 700 14 举报帖子
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大家好!
我的目的条带是1.8k,PCR后电泳条带很单一,切胶回收后,出现了两条带(1.8k,1k),我将1.8k的条带再次切胶回收,跑胶检测时,还是有两条带,于是又切胶,又回收,共收了4次,检测还是有两条带。这两条带大小差距还蛮大的,不可能是切胶造成的,但是又是什么原因呢?要怎样解决呢?
我已经做了很多次了,都是这个结果,郁闷死了!
请大家帮帮忙!可能的话,可以QQ联系我:736928382。
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  • 精华评论
  • 原海亮

    额,好神奇的实验,可以将电泳缓冲液重新配置,核酸胶也尽量现配现用,避免电泳时外界的核酸进去污染。

  • ken19860823

    是不是载体片段,你的这个片段?

  • 含羞草liu

    引用回帖:
    3楼: Originally posted by ken19860823 at 2016-03-11 12:30:24
    是不是载体片段,你的这个片段?

    引物是在载体上设计的,不会是载体片段,载体很大。。。

  • yvonne9044

    你可真逗,我都被你的执着感动了,胶回收需要换电解液的,另外你换下回收的盒子试试吧

  • viki_MDK

    如果确定不是污染的话,,两个片段都测序看看不久清楚了

  • nannanz2012

    肯定有污染,有可能是凝胶回收的溶液被污染等原因造成的。

  • 含羞草liu

    引用回帖:
    5楼: Originally posted by yvonne9044 at 2016-03-11 14:32:03
    你可真逗,我都被你的执着感动了,胶回收需要换电解液的,另外你换下回收的盒子试试吧

    换了电解液,第一次出现这种情况我就想到可能是污染了,就把胶收用到的电解液,洗脱液都换了新的

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