大家好,我现在要做质粒,与载体的连接实验。但是有个体系不会算,就是载体与目的片段基因的摩尔比是1:10,我现在知道各自的浓度,连体体系10ul,那么,摩尔比怎么计算啊?取多少ul是1:10关系? 返回小木虫查看更多
NEB摩尔比计算 http://nebiocalculator.neb.com/#!/ligation
做分子生物3年了,从没算过,大约就行。 双链DNA分子量估计方法:660*链长 ,然后直接用质量浓度/摩尔质量,既得摩尔浓度。
做了若干个分子了,从来都是看心情,心情不好了多加点,心情不好少加点。 心情好了26度连2个小时,心情不好16度过夜,然后回家睡大觉。
但是,一般载体加25-50ng,片段比它多点。
不用这么精确 我一般都是DNA:载体=3:1
刚进来也是说,有公式要算,后来真是看心情,浓度高了少加一点,浓度低了多加一点,保证目的片段的量足够多
这是我实验本上的 FullSizeRender.jpg ,
NEB摩尔比计算
http://nebiocalculator.neb.com/#!/ligation
做分子生物3年了,从没算过,大约就行。 双链DNA分子量估计方法:660*链长 ,然后直接用质量浓度/摩尔质量,既得摩尔浓度。
做了若干个分子了,从来都是看心情,心情不好了多加点,心情不好少加点。
心情好了26度连2个小时,心情不好16度过夜,然后回家睡大觉。
但是,一般载体加25-50ng,片段比它多点。
不用这么精确 我一般都是DNA:载体=3:1
刚进来也是说,有公式要算,后来真是看心情,浓度高了少加一点,浓度低了多加一点,保证目的片段的量足够多
这是我实验本上的
FullSizeRender.jpg
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