打算用TAIL-PCR克隆基因的启动子,但不知随机兼并引物(AD PRIMER)如何设计,请高手赐教 返回小木虫查看更多
看一下华南农刘耀光的文章。
Liu Y-G* and Chen Y (2007) High-efficiency thermal asymmetric interlaced PCR for amplification of unknown flanking sequences. BioTechniques 43, 649-656. 这是他改进后发的文章。
估计你做的是多倍体或不重要的物种,所以没有基因组序列,对于基因组大的物种(大于水稻),tailPCR很难。建议用反向PCR。合成引物要到信誉好的公司,拿到引物后要自己检测一下引物质量。 一师兄国内做TAIL-PCR总是很不稳定,但到了米帝,从来没有fail过! 祝好!
看一下华南农刘耀光的文章。
请问您知不知道刘耀光具体的哪篇介绍方法或原理的文章?
Liu Y-G* and Chen Y (2007) High-efficiency thermal asymmetric interlaced PCR for amplification of unknown flanking sequences. BioTechniques 43, 649-656. 这是他改进后发的文章。
好的,谢谢啦
估计你做的是多倍体或不重要的物种,所以没有基因组序列,对于基因组大的物种(大于水稻),tailPCR很难。建议用反向PCR。合成引物要到信誉好的公司,拿到引物后要自己检测一下引物质量。
一师兄国内做TAIL-PCR总是很不稳定,但到了米帝,从来没有fail过!
祝好!
谢谢!
这个是所有启动子都能克隆吗?这个引物怎么设计?我看着好像是做突变体插入序列的
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