我想做真菌代谢产物提取实验,请问哪位做过?能否分享方法呢?我主要做的是镰刀菌,万分感谢! 返回小木虫查看更多
除了经验和方法你还需要别的吗?
1.首先大规模发酵(10L),固体培养或者液体培养皆可,28度培养 2、收集菌块,泡于甲醇/乙酸乙酯/乙酸做萃取液,连续泡若干日,每次以水萃取 3、得到的粗提物再用醇或乙酸乙酯划段,分别蒸干 4、通过正反向硅胶柱或者分子筛进一步筛选,必要时可结合高效液相。 5、得到化合物纯度足够,则可去进行质谱或者核磁谱检测,最终确定分子量和化学结构。
你这个问题太难回答了。都不知道你到底要什么样的代谢产物,性质如何。只有知道大体你要的什么东西,根据特性去分才可以,要不然无从下手啊。你都不知道你到底是要胞内的还是胞外的,初级代谢产物还是次级代谢产物等等。
1. 离心 菌丝和发酵上清分开处理 2. 菌丝用酸处理破壁,乙酸乙脂萃取,过固相萃取柱,液相分析或者制备液相收集 3. 发酵上清的步骤和上面相似。你如果想得到挥发性的顶空微萃取后上气相了。 分析为主,大量制样貌似要过柱子了。
晕,太难回答了
除了经验和方法你还需要别的吗?
1.首先大规模发酵(10L),固体培养或者液体培养皆可,28度培养
2、收集菌块,泡于甲醇/乙酸乙酯/乙酸做萃取液,连续泡若干日,每次以水萃取
3、得到的粗提物再用醇或乙酸乙酯划段,分别蒸干
4、通过正反向硅胶柱或者分子筛进一步筛选,必要时可结合高效液相。
5、得到化合物纯度足够,则可去进行质谱或者核磁谱检测,最终确定分子量和化学结构。
你这个问题太难回答了。都不知道你到底要什么样的代谢产物,性质如何。只有知道大体你要的什么东西,根据特性去分才可以,要不然无从下手啊。你都不知道你到底是要胞内的还是胞外的,初级代谢产物还是次级代谢产物等等。
嗯,谢谢,请问有什么要注意的问题吗?
不好意思,这个领域我比较陌生,表达不清楚,谢谢你,我需要的是此生代谢产物,胞外和胞内的都要,胞外的主要是要得到一些挥发性物质
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1. 离心 菌丝和发酵上清分开处理
2. 菌丝用酸处理破壁,乙酸乙脂萃取,过固相萃取柱,液相分析或者制备液相收集
3. 发酵上清的步骤和上面相似。你如果想得到挥发性的顶空微萃取后上气相了。
分析为主,大量制样貌似要过柱子了。
晕,太难回答了