本人非分析专业,最近做的高效液相色谱用C18柱,不同比例的水和甲醇做流动相,发现物质峰均在溶剂峰处出现,加大进样体积,峰变高。有人说这是样品没有被柱子吸附直接被洗下来的原因,但一直找不到合适的解决办法。 请教各位高手,这种现象是什么原因,该如何解决 返回小木虫查看更多
一般而言,一般而言啊,要看你化合物是酸性还是碱性的,要是含有羟基或者羧基的,就在流动相里面添加磷酸来增加流动相酸性,抑制化合物电离,延长保留,要是含有氨基的,就用氨水来把流动相调成碱性,注意柱子使用PH值范围。如果是两性的,就要使用一些离子对了。当然啊,这只是一般的啊,好多东西要具体问题,具体对待,
使用正相柱子看看 C18 是反向柱子啊
问个问题 别笑话我 溶剂还有峰
方便上传谱图么?或者说一下详细的色谱条件。包括流动相、流速等等。
楼主的问题太大。 1.应选择合适的柱子。非极性物质用正相柱,极性物质用反相柱。楼主的物质没有分离开很有可能是楼主的柱子选错了。 2.选择合适的流动相,c18柱还可以用乙腈作流动相试试。 3.流速、柱温对物质的分离也有影响。 加大进样量不会使物质的分离度变得更好。
你的溶剂用色谱级别的,应该一般没有峰出来吧
试一试降低柱温,调节流动相参数或改用其他流动相(如乙腈)吧
一般而言,一般而言啊,要看你化合物是酸性还是碱性的,要是含有羟基或者羧基的,就在流动相里面添加磷酸来增加流动相酸性,抑制化合物电离,延长保留,要是含有氨基的,就用氨水来把流动相调成碱性,注意柱子使用PH值范围。如果是两性的,就要使用一些离子对了。当然啊,这只是一般的啊,好多东西要具体问题,具体对待,
使用正相柱子看看
C18 是反向柱子啊
问个问题 别笑话我 溶剂还有峰
方便上传谱图么?或者说一下详细的色谱条件。包括流动相、流速等等。
楼主的问题太大。
1.应选择合适的柱子。非极性物质用正相柱,极性物质用反相柱。楼主的物质没有分离开很有可能是楼主的柱子选错了。
2.选择合适的流动相,c18柱还可以用乙腈作流动相试试。
3.流速、柱温对物质的分离也有影响。
加大进样量不会使物质的分离度变得更好。
你的溶剂用色谱级别的,应该一般没有峰出来吧
试一试降低柱温,调节流动相参数或改用其他流动相(如乙腈)吧