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对PCR产物加A尾

作者 brightjoe
来源: 小木虫 300 6 举报帖子
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我用的是高保真酶,PCR产物为平滑末端,如何用Taq酶对PCR产物加A尾?望说得详细一点。谢谢

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-16 at 09:54 ] 返回小木虫查看更多

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  • 精华评论
  • merkel

    看pGEM-T 载体的说明书,上面有,说明书网上有的下

  • zhaolixia0814

    用过天根的加A反应液,就是利用DNA聚合酶与dATP反应来加A,按说明书操作即可,效果还可以

  • dyyyyy

    法一:所有循环结束后,暂停反应,在反应体系中加少量taq酶,72℃40min即可。
    法二:pfu和taq混合跑pcr,即可加尾

  • yangxiaofei

    我是用TOYOBO KOD-plus扩,加尾很简单,反应结束后,50μ体系中加入1μTaq酶,72度保温10min即可,不需要格外加dATP,因为体系中的dATP是绝对足够的,特别是T载,很好连,也不需要所有的都加上尾巴,有一些就够了,

  • wrb456

    你用高保真酶正常PCR结束之后,加入taq酶及其相应buffer,72℃半小时即可!

  • gastrodia

    无需加尾,直接连平端载体transgen的pEASY-blunt,双抗(amp+kan),topo克隆5min搞定

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