金币求助,过柱
现准备装一个内径10cm的硅胶柱,有几个问题想请教一下:
1、准备上样干膏25g,拌样后50g左右,内径10cm是否合适?
2、径高比1:8~10是什么?是装柱后柱子内径与硅胶高度的比例吗?
3、如选择内径10cm的柱子,装柱硅胶高度大概是多少?是80~100cm,这好像不太合适吧,计算一下用的硅胶量太大了
4、如果上样高度1cm,装柱硅胶高度大概多少?
5、内径10cm的柱子,湿法上样好还是干法上样好,湿法上样要加脱脂棉、玻璃球吗?
6、粗分一般设几个梯度?梯度的筛选跑板如何确定?
新手弱弱的问 感谢回帖
[ Last edited by songe0310 on 2009-9-9 at 14:13 ] 返回小木虫查看更多
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呵呵,对的。过柱子基本上是经验之谈,更多的是自己摸索。你可以试试两次过柱子的结果,能重复上比较难。更多的时候你可以把它和HPLC一起想想,比如上样量,最小冲洗倍数,乙醇含量,都是有一定的相关性的。
粗分,你的以上条件可以,用湿法较好
1、准备上样干膏25g,拌样后50g左右,内径10cm是否合适?
要是粗分的话,样品:硅胶=1:20~30,那么可用硅胶500~750g.
2、径高比1:8~10是什么?是装柱后柱子内径与硅胶高度的比例吗?
是的
3、如选择内径10cm的柱子,装柱硅胶高度大概是多少?是80~100cm,这好像不太合适吧,计算一下用的硅胶量太大了
你用750g硅胶装装看看有多高。
4、如果上样高度1cm,装柱硅胶高度大概多少?
粗分的话,一般来说柱样高度比大于20就可以了
5、内径10cm的柱子,湿法上样好还是干法上样好,湿法上样要加脱脂棉、玻璃球吗?
干法湿法都可以。
6、粗分一般设几个梯度?梯度的筛选跑板如何确定
一般可分8~10梯度,
1、柱子太粗了!
2、柱子装的长短得综合考虑,结合薄层板来定,如果吸附比较厉害,可以相对短一点。