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分类	共搜索到 216 个相关话题(最多显示前5000个)	作者	最后发表

分子生物	怀疑提质粒时提到了杂菌的质粒，求大家给帮着分析分析虽然没线性化看不出实际大小，但大小是差不多的，不会相差3000bp这么多。我用的质粒是...随后我用通用引物，以质粒为模板跑了PCR，都跑出了3000的目的条带，诡异的是某些样品点样孔依然发亮。...	ggyy0911	2014-12-08 10:58
硕博家园	PCR体系优化您好，我之前跑出了我的目的片段，后来怎么跑都跑不出来，有时跑出来条带不是很亮，好几次都跑除了下面的图，不知道该怎么办了，我是做甲基化的，用的亚硫酸盐处理后的DNA。请各位提供宝贵...	赫玉影	2014-11-27 06:41
硕博家园	overlap PCR问题求助后胶回收ABC条带，用胶回收的ABC重新跑电泳，居然还是有原来的四条带在，已经切胶切得很少了。以胶回收的ABC片段为模版，...后面用胶回收的ABC片段再次胶回收，PCR还是扩增不出ABC目的条带。...	晗笑珊珊	2014-11-13 07:43
分子生物	半定量RT-PCR做组织表达分析，循环数问题 30个循环基本是大家默认的循环数，30个都不出带，能否认为就没有，...如果说要把条带跑出来，也就是得跑32个循环，虽然能看出有没有表达，但是在这么高的循环下，对于看有无差异就很不利了。...	踏雪无极限	2014-11-13 02:00
分子生物	连接克隆载体提取质粒结果跑出两条带连了很多次，每次16度连接过夜，后转化到感受态细胞中，挑菌过夜后进行菌液pcr，每次都有很多杂带出现，目的条带也不是很亮。...1：为什么提取质粒的条带与双酶切的跑胶结果是一样的呢？...	张冰宝	2014-11-03 07:44
分子生物	DNA跑胶出现了以下问题，目的条带是100多，用的是DL2000，条带出来了就是太粗了，不知道是哪里出了问题，做的是鼠尾鉴定，抽的小鼠尾巴的DNA，然后PCR的，用的是goldview，有师兄说是和染料还有跑...	1109841141	2014-10-26 03:18
分子生物	T-RFLP中回收及酶切相关问题 PCR体系为25ul,用通用引物扩增出目的片段，1500bp左右，条带较亮且单一，无引物...结果还是没有条带，正常情况如果不酶切的话，那条目的条带应该是存在的吧，但是酶切之后没有，说明是切开了？...	张永婧1991	2014-10-25 08:06
分子生物	请大家帮我分析下这张电泳图的问题我跑的是Cre基因，目的条带在140bp左右，阳性对照是280bp，PCR扩增结束后用2.5%的琼脂糖凝胶120v的电压进行电泳，但是跑出的电泳图不管是WT还是KO的都有140bp的条带，不好分辨，不知道出了...	wxy19911226	2014-10-24 03:58
分子生物	PCR反应体系改变会导致电泳不出带吗但由于是新手的关系，忘记加空白对照跟Marker，加上电泳时间长了一点，所以无法确定P出来的条带是否为目的的管家...就只是改变了反应体系，PCR反应条件一直没有改变，但是电泳后跑不出条带。...	小朱大宝	2014-10-20 07:26
分子生物	各位大神，帮忙分析一下pcr只跑出引物二聚体，没有目的条带！做的是菌液pcr，之前一直都可以跑出目的条带，有时会有引物二聚体，但是目的条带也都是比较亮的，但是最近只有引物二聚体了，做了很多次还是这样，找不到原因。pcr是25微升的体系LA0.210...	aounao	2014-10-13 01:18
分子生物	为啥RT-PCR的空白对照也出现了目的条带？做RT-PCR时，为了保证不是RNA的质量问题引起的失败，在反转录...奇怪的是我的目的条带大概就在1000，这个结果差不多正确，1500bp的marker，但为啥加了无菌水代替RNA的也能出目的条带？...	wu-ke-da	2014-10-13 07:16
分子生物	为啥RT-PCR 做RT-PCR时，为了保证不是RNA的质量问题引起的失败，在反转录...奇怪的是我的目的条带大概就在1000，这个结果差不多正确，1500bp的marker，但为啥加了无菌水代替RNA的也能出目的条带？...	wu-ke-da	2014-10-13 07:12
分子生物	重组质粒PBI121用XbaI和SmaI酶切问题之前用切过的质粒链接后，长出菌落，做菌落PCR跑电泳，发现条带大小与目的基因不相同，急求这是什么原因？左边四泳道是空质粒，最右边是空质粒。[eimg]2014/1005/w64h3251179_1412440330_...	小木可	2014-10-04 04:18
生物科学	求大侠解惑重组质粒枯草杆菌转化质粒双酶切都说明质粒重组正确，枯草转化的时候平板阴阳对照正常，转化菌株也有长出，但是菌落pcr和菌液pcr...前一天菌落pcr后跑胶，有微量目的条带，但与对照比较弱，今天菌液pcr又没结果了。...	冯英慧1101	2014-09-24 05:31
分子生物	菌落PCR跑出目的条带但提取菌液质粒跑出其他条带？小生在做基因重组，目的片段675bp，连接转化后挑菌培养时顺带做了菌落PCR，能够跑出目的条带，但是目的条带不整齐；...为什么菌落跑得出菌液跑不出，菌液提取质粒后条带不是目的条带且不整齐，...	未婚	2014-09-21 03:57
分子生物	急求T载体连接问题！ PCRmas那个酶，然后回收目的DNA，跑胶检测有目的条带，回收成功。现在出现一个问题，我用Takara的pMD18T载体和我的DNA以1:4:...ug/ml长了不到10个，菌落偏小，可是挑单菌落PCR后没有目的条带！...	ghj19900225	2014-09-15 03:07
分子生物	胶回收时跑不出条带小弟做基因克隆，PCR后跑电泳观察，上样量4ul，跑出的条带很亮，而且片段大小正确1000bp，然后进行胶回收，把4管PCR产物混一起，每个胶孔上样40ul，跑电泳后发现目的片段处没有条带，反而在...	childchou	2014-09-07 12:10
分子生物	Northern 检测，RNA无带，对照DNA片段有带 0.5ssc0.1%sds，温度尝试过68、65、50，50度最好（使用DNA引物20bp左右，也可以杂交出目的带*）...但是都没有，RNA泳道就像是一大条马路一样（下图），每次提完RNA都会跑凝胶电泳，结果...	84146922	2014-08-18 12:46
分子生物	切胶回收后加尾跑电泳问题求助 PCR过程中使用的是KOD酶，切胶回收目的条带后准备做连接，需要加尾，加尾后纯化了，然后电泳检测，发现跑出很多条带，不知道为什么，求解答！第一条是Marker，后面都是加尾纯化的样品点的样...	漂流瓶1991	2014-08-04 11:55
硕博家园	PCR-RFLP酶切分型求助小的最近做的是PCR-RFLP来多态性分析，能够很好P出目的条带，就直接用PCR产物用来酶切。...朋友建议说是酶切不完全，于是我做了3个酶切体系，1.PCR产物10ul，酶1ul（10U），2.PCR产物15ul，酶1...	qihe77	2014-07-14 07:52
分子生物	菌落PCR有目的条带，质粒提取后质量良好，可是质粒PCR却没有目的... 我提取质粒后跑电泳，条带比5微升的marker亮一点，然后用15微升体系做质粒pcr，质粒添加量为0.3微升，结果P不出目的基因，这是怎么回事	蓝色泡沫321	2014-07-04 06:50
分子生物	质粒ＤＮＡ双酶切，怎么切不开最近把好不容易PCR扩增出了目的条带，连接Ｔ载体（T载体是T-Easyvector转化，菌落ＰＣＲ、提质粒DNA都有条带，在双酶切时，却怎么也切不开，用的酶是ThermoScientific的快切酶，KpnI...	韩元富豪	2014-06-25 12:11
转基因	PCR做点基因突变结果没有突变片段 Taq跑的pcr，质粒9K大小，质粒载体上目的片段6K，引物72个碱基，然后回收产物连T3载体，测序结果没有碱基突变啊~还有我LA酶是在...如果一开始就加酶的话跑不出来东西，求问这是为啥啊~急求啊~...	落风吟	2014-06-08 09:42
分子生物	融合产物作为模板P不出来，求大神指点！首先PCR扩增出目的基因，然后将前两个基因和后两个基因分别融合，然后胶回收获得大小一致的融合片段，又将这两个融合片段融合在...以最终的胶回收融合产物为模板PCR，P出来的大小应该是2700bp...	zhou325912	2014-05-28 05:43
有奖问答	PCR条带不争气且弥漫我是PCR新手，我用的条件是98度5min,98度10sec,55度5sec,72度1min,共30循环72度10min不知道...跑出的电泳图是这样的目的条带位置不正确且条带有拖尾现象我的目的序列大约是420bp和560bp...	jasmine1990	2014-05-20 05:23

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