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分子生物 干货分享|PCR和凝胶电泳实验结果常见问题及原因分析
PCR的阳性对照是Marker,推测PCR产物长度,判断PCR产物是否是目的片段。PCR的阴性对照是PCR的空白管,除了模板不加之外,...重新设计引物(避免链间二聚体和链内二级结构)或者换一管新引物;...
科研实验_研实 2024-04-26 06:53
生物科学 PCR引物设计,史上最全的关键点!
两引物之间也不应具有互补性,尤其应避免3′端的互补重叠以防止引物二聚体(Dimer与Crossdimer)的形成。...而3′端不可修饰引物的5′端决定着PCR产物的长度,它对扩增特异性影响不大。...
科研战神·王 2024-04-19 07:45
医学 PCR实验,需要哪些组分/条件,值得收藏!
同样重要的是,引物的序列不能具有互补性(特别是3’末端),若两个引物互补会促进退火(即,引物二聚体),自我互补会导致自我配对(即,二级结构),或序列的直接...以去除非全长产物和未...
医学验证123 2024-04-19 05:31
生物科学 PCR反应污染原因追踪及污染处理方法
UV照射时,PCR产物中嘧啶碱基会形成二聚体,这些二聚体可使延伸终止,但并不是DNA链中所有嘧啶均能形成二聚体,且UV照射还可使二聚体断裂。...以后的PCR循环中用逆转录引物的B区和引物C进行扩...
基础生物实验外 2024-04-15 01:54
分子生物 干货分享|PCR实验,需要哪些组分/条件,值得收藏!
同样重要的是,引物的序列不能具有互补性(特别是3’末端),若两个引物互补会促进退火(即,引物二聚体),自我互补会导致自我配对(即,二级结构),或序列的直接...以去除非全长产物和未...
科研顾问_Gu 2024-04-12 09:23
生物科学 PCR和凝胶电泳实验结果常见问题及原因分析
PCR的阳性对照是Marker,推测PCR产物长度,判断PCR产物是否是目的片段。PCR的阴性对照是PCR的空白管,除了模板不加之外,...重新设计引物(避免链间二聚体和链内二级结构)或者换一管新引物;...
基础生物实验外 2024-04-10 12:42
分子生物 PCR反应污染原因追踪及污染处理方法
UV照射时,PCR产物中嘧啶碱基会形成二聚体,这些二聚体可使延伸终止,但并不是DNA链中所有嘧啶均能形成二聚体,且UV照射还可使二聚体断裂。...以后的PCR循环中用逆转录引物的B区和引物C进行扩...
科研战神·王 2024-04-02 05:55
生物科学 PCR和凝胶电泳实验结果常见问题及原因分析
PCR的阳性对照是Marker,推测PCR产物长度,判断PCR产物是否是目的片段。PCR的阴性对照是PCR的空白管,除了模板不加之外,...重新设计引物(避免链间二聚体和链内二级结构)或者换一管新引物;...
科研战神·王 2024-03-29 01:33
生物科学 引物设计与验证的注意事项
前置知识引物是一种短的DNA或RNA序列,用于在PCR(聚合酶链式...引物长度(primerlength)常用的是18-27bp,但不应大于38bp,因为过长会导致其延伸温度太高,不适合DNA聚合酶进行反应3.3’端...
科研狗的日常吖 2024-03-07 10:26
分子生物 如何设计PCR引物
7、引物之间两引物之间不应有互补性,尤应避免3′端的互补重叠以防引物二聚体的形成。一对引物间不应多于4个连续...9、引物的5′端引物的5′端限定着PCR产物的长度,它对扩增特异性影响不大。...
科研战神·王 2024-02-29 01:15
分子生物 PCR反应污染原因追踪及污染处理方法
UV照射时,PCR产物中嘧啶碱基会形成二聚体,这些二聚体可使延伸终止,但并不是DNA链中所有嘧啶均能形成二聚体,且UV照射还可使二聚体断裂。...以后的PCR循环中用逆转录引物的B区和引物C进行扩...
科研战神·王 2024-02-28 12:40
分子生物 PCR引物设计,史上最全的关键点!
两引物之间也不应具有互补性,尤其应避免3′端的互补重叠以防止引物二聚体(Dimer与Crossdimer)的形成。...而3′端不可修饰引物的5′端决定着PCR产物的长度,它对扩增特异性影响不大。...
科研战神·王 2024-02-04 05:35
分子生物 引物设计与验证的注意事项
前置知识引物是一种短的DNA或RNA序列,用于在PCR(聚合酶链式...引物长度(primerlength)常用的是18-27bp,但不应大于38bp,因为过长会导致其延伸温度太高,不适合DNA聚合酶进行反应3.3’端...
球场下雪了 2024-01-15 01:38
生物科学 PCR反应污染原因追踪及污染处理方法
UV照射时,PCR产物中嘧啶碱基会形成二聚体,这些二聚体可使延伸终止,但并不是DNA链中所有嘧啶均能形成二聚体,且UV照射还可使二聚体断裂。...以后的PCR循环中用逆转录引物的B区和引物C进行扩...
科研小努力 2024-01-06 03:20
分子生物 RNA反转录
该酶是一种分子量为170-kDa的异二聚体,最佳反应温度范围为42-48℃。...五、主要反应组分除了反转录酶和引物之外,其它主要反应组分还包括RNA模板(预处理以去除基因组DNA)、缓冲液、dNTP、...
科研小努力 2023-11-21 03:52
生物科学 干货分享|RNA反转录
该酶是一种分子量为170-kDa的异二聚体,最佳反应温度范围为42-48℃。AMV反转录酶具有较强的RNaseH活性,可降解RNA:cDNA复合物中...图片图4.cDNA的长度和产量受到所选择引物和引物浓度的影响。...
李英华001 2023-10-19 01:34
生物科学 PCR污染处理方式
UV照射时,PCR产物中嘧啶碱基会形成二聚体,这些二聚体可使延伸终止,但并不是DNA链中所有嘧啶均能形成二聚体,且UV照射还可使二聚体断裂。...以后的PCR循环中用逆转录引物的B区和引物C进行扩...
科研小努力 2023-10-13 06:22
分子生物 干货分享|PCR反应污染原因追踪及污染处理方法
UV照射时,PCR产物中嘧啶碱基会形成二聚体,这些二聚体可使延伸终止,但并不是DNA链中所有嘧啶均能形成二聚体,且UV照射还可使二聚体断裂。...以后的PCR循环中用逆转录引物的B区和引物C进行扩...
球场下雪了 2023-10-13 01:12
分子生物 干货分享|招招解决qPCR曲线的疑难杂症
不同DNA分子由于长度GC含量的不同,Tm值有所不同,因此可以根据熔解曲线是否单峰、以及Tm值大小来判断非特异性扩增以及引物二聚体。良好的扩增曲线熔解曲线的标准主要有:1)扩增曲线有...
球场下雪了 2023-10-10 01:57
生物科学 PCR引物设计,史上最全的关键点!
两引物之间也不应具有互补性,尤其应避免3′端的互补重叠以防止引物二聚体(Dimer与Crossdimer)的形成。...而3′端不可修饰引物的5′端决定着PCR产物的长度,它对扩增特异性影响不大。...
科研小努力 2023-09-01 07:02
生物科学 PCR引物设计,史上最全的关键点!
两引物之间也不应具有互补性,尤其应避免3′端的互补重叠以防止引物二聚体(Dimer与Crossdimer)的形成。...而3′端不可修饰引物的5′端决定着PCR产物的长度,它对扩增特异性影响不大。...
科研小努力 2023-08-10 08:13
医学 5分钟学会如何设计PCR引物
7、引物之间两引物之间不应有互补性,尤应避免3′端的互补重叠以防引物二聚体的形成。一对引物间不应多于4个连续...9、引物的5′端引物的5′端限定着PCR产物的长度,它对扩增特异性影响不大。...
28968058wj 2023-05-09 02:53
生物科学 5分钟学会如何设计PCR引物
7、引物之间两引物之间不应有互补性,尤应避免3′端的互补重叠以防引物二聚体的形成。一对引物间不应多于4个连续...9、引物的5′端引物的5′端限定着PCR产物的长度,它对扩增特异性影响不大。...
球场下雪了 2023-05-09 01:10