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分类 共搜索到 901 个相关话题(最多显示前5000个) 作者 最后发表
医学 PCR实验，需要哪些组分/条件，值得收藏！
如同样扩增2kb片段，若使用Taq酶只需要1分钟，使用Pfu酶则应设定2分钟以上。延伸时间过长会导致非特异性扩增带的出现。时间太短则可能得不到扩增产物或得到一些短的非特异性片段。4.循环...
 医学验证123 2024-04-19 05:31
生物科学 PCR反应污染原因追踪及污染处理方法
2.反应液污染可采用下列方法之一处理：(1)DNaseI法：PCR混合液（未加模板和Taq聚合酶）加入0.5UDNaseI,室温反应30min后加热灭活，然后加入模板和Taq聚合酶进行正常PCR扩增。该方法的优点是...
 基础生物实验外 2024-04-15 01:54
分子生物 干货分享|PCR实验，需要哪些组分/条件，值得收藏！
如同样扩增2kb片段，若使用Taq酶只需要1分钟，使用Pfu酶则应设定2分钟以上。延伸时间过长会导致非特异性扩增带的出现。时间太短则可能得不到扩增产物或得到一些短的非特异性片段。4.循环...
 科研顾问_Gu 2024-04-12 09:23
生物科学 PCR和凝胶电泳实验结果常见问题及原因分析
氯化镁（MgCl2）：作为Taq聚合酶活性的辅助因子，对于酶的功能至关重要。1.耗材选择不当对实验结果造成很大的影响PCR耗材一般都是聚丙烯（PP）材质，因其为生物学惰性材料，表面不易于粘附...
 基础生物实验外 2024-04-10 12:42
分子生物 PCR反应污染原因追踪及污染处理方法
2.反应液污染可采用下列方法之一处理：(1)DNaseI法：PCR混合液（未加模板和Taq聚合酶）加入0.5UDNaseI,室温反应30min后加热灭活，然后加入模板和Taq聚合酶进行正常PCR扩增。该方法的优点是...
 科研战神·王 2024-04-02 05:55
分子生物 地高辛标记探针技术
3.2.2PCR掺入法这种标记方法是通过聚合酶链式反应，在Taq酶的作用下，将DIG-11-dUTP掺入到新合成的DNA链中。以本法标记的探针不但灵敏度高，产量也很高。少量的基因组DNA(1ng～50ng)便可...
 长沙瀚辰生物 2024-04-01 07:30
生物科学 PCR和凝胶电泳实验结果常见问题及原因分析
氯化镁（MgCl2）：作为Taq聚合酶活性的辅助因子，对于酶的功能至关重要。1.耗材选择不当对实验结果造成很大的影响PCR耗材一般都是聚丙烯（PP）材质，因其为生物学惰性材料，表面不易于粘附...
 科研战神·王 2024-03-29 01:33
分子生物 PCR反应污染原因追踪及污染处理方法
2.反应液污染可采用下列方法之一处理：(1)DNaseI法：PCR混合液（未加模板和Taq聚合酶）加入0.5UDNaseI,室温反应30min后加热灭活，然后加入模板和Taq聚合酶进行正常PCR扩增。该方法的优点是...
 科研战神·王 2024-02-28 12:40
生物科学 干货分享|PCR、qPCR、RT-PCR、RT-qPCR、Real-Time PCR的区别
而当PCR扩增时（在延伸阶段），探针会被Taq酶的5'→3'外切酶活性酶切降解，使报告基团和淬灭基团分离，报告基团发射底的荧光不会再被吸收，从而可以在荧光监测系统接收到荧光信号，即每扩增...
 MDL医学实验 2024-02-21 01:15
微生物 常用PCR技术及原理
PCR扩增时，Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的...
 MDL医学实验 2024-02-19 08:19
分子生物 超高特异性Taq聚合酶，让基因编辑想错都难！
超高特异性Taq酶可以精准识别单个碱基错配，对基因编辑来说堪比一把利刃，谁能够完美掌控这把绝世好剑，谁就能在基因工程的江湖里傲视群雄！剑指难关近年来，基因编辑技术领域可谓刀光剑影...
 Turtle_tech 2024-01-31 08:40
生物科学 质粒提取的小技巧
Mg2+，dNTPs，但不含引物和Taq酶，然后可以10×分装或一管储存在-20度，在需要的时候拿出融开，然后按所需的PCR反应个数吸取相应的倍数，再补加相应反应倍数的Taq和引物，混匀后分装，这样...
 Sh毕合生物 2024-01-25 12:04
分子生物 较长基因的慢病毒过表达载体构建不成功
当我使用普通的、非高保真taq酶扩增出来的目的片段，又可以在上述某试剂盒作用下与载体连接，菌落PCR阳性，但测序提示会有错义突变和片段缺失（送了六个菌测序，每一个突变缺失位置都不太...
 tianyu1201 2024-01-19 07:46
生物科学 PCR反应污染原因追踪及污染处理方法
2.反应液污染可采用下列方法之一处理：(1)DNaseI法：PCR混合液（未加模板和Taq聚合酶）加入0.5UDNaseI,室温反应30min后加热灭活，然后加入模板和Taq聚合酶进行正常PCR扩增。该方法的优点是...
 科研小努力 2024-01-06 03:20
生物科学 PCR污染处理方式
2.反应液污染可采用下列方法之一处理：（1)DNaseI法：PCR混合液（未加模板和Taq聚合酶）加入0.5UDNaseI,室温反应30min后加热灭活，然后加入模板和Taq聚合酶进行正常PCR扩增。该方法的优点是...
 科研小努力 2023-10-13 06:22
分子生物 干货分享|PCR反应污染原因追踪及污染处理方法
2.反应液污染可采用下列方法之一处理：(1)DNaseI法：PCR混合液（未加模板和Taq聚合酶）加入0.5UDNaseI,室温反应30min后加热灭活，然后加入模板和Taq聚合酶进行正常PCR扩增。该方法的优点是...
 球场下雪了 2023-10-13 01:12
分子生物 干货分享|招招解决qPCR曲线的疑难杂症
引物二聚体是引物3’端的部分碱基互补结合，在Taq酶的作用下，3’端延伸后得到的小分子量的双链DNA片段。可根据NTC（无模板阴性对照）判断是否为引物二聚体。解决方案：建议通过提高模板...
 球场下雪了 2023-10-10 01:57
分子生物 酵母筛库在菌P阶段有问题，好心的大佬们，帮帮我吧
本人做酵母筛库，现在这个阶段在做酵母菌P，只有第一天菌P做出来清晰的条带，后面三四天都是弥散的条带，这期间试过使用2*RpaidTaq酶、普通Taq酶，HighGC酶，试过液氮热激破壁法，都没有用...
 l刺客联盟 2023-09-28 01:05
分子生物 干货分享|常用PCR技术及原理
PCR扩增时，Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的...
 球场下雪了 2023-09-25 12:09
医学 干货分享|常用PCR技术及原理
PCR扩增时，Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的...
 MDL谭焕焕 2023-09-25 12:52
生物科学 质粒提取的小技巧
Mg2+，dNTPs，但不含引物和Taq酶，然后可以10×分装或一管储存在-20度，在需要的时候拿出融开，然后按所需的PCR反应个数吸取相应的倍数，再补加相应反应倍数的Taq和引物，混匀后分装，这样...
 Sh毕合生物 2023-09-21 05:49
分子生物 overlap pcr
overlappcr，Taq酶和KOD条带不一样，KOD没有目标条带但是Taq有目标条带，想问问大家。求求了
 FRUNCE 2023-08-15 07:29
分子生物 定量PCR-荧光定量PCR
PCR扩增时,Taq酶的5’端-3’端外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的...
 28968058wj 2023-07-17 08:28
分子生物 毕合生物知识分享-PCR反应体系
利用抗Taq单克隆抗体与Taq酶结合来抑制Taq聚合酶的活性，进一步抑制在低温条件下出现诱引物和模板DNA非特异性杂交或引物二聚体引起的非特异性扩增，提高目的片段的产量。(较低温度下引物可...
 Sh毕合生物 2023-04-21 08:34
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