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生物科学
分子克隆实验——无缝克隆
胶
回收PCR产物
。03克隆筛选:平板抗性不足:确保使用正确的抗生素,并使用新鲜制备的抗生素平板。3.菌落PCR无条带主要有以下可能的情况和建议:01载体制备:重组失败:若只有空质粒条带,...
科研战神·王
2024-04-19 02:31
分子生物
干货分享|液相如何改善峰形与提高分离度!
秘诀3:粗调转微调RT-
PCR
是逆转录
PCR
,采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA,再以cDNA为模板进行
PCR
扩增,结果只能定性,不能定量。1.流动相的性质要求...⑥样品易于
回收
。...
YX科研小助理
2024-03-25 01:12
生物科学
无缝克隆常见问题解答
胶
回收PCR产物
。03克隆筛选:平板抗性不足:确保使用正确的抗生素,并使用新鲜制备的抗生素平板。3.菌落PCR无条带主要有以下可能的情况和建议:01载体制备:重组失败:若只有空质粒条带,...
科研战神·王
2024-03-18 01:38
生物科学
干货分享|无缝克隆常见问题解答
胶
回收PCR产物
。03克隆筛选:平板抗性不足:确保使用正确的抗生素,并使用新鲜制备的抗生素平板。3.菌落PCR无条带主要有以下可能的情况和建议:01载体制备:重组失败:若只有空质粒条带,...
实验助手
2024-03-15 09:06
医学
动物模型|荧光素酶表达的淋巴瘤NCG小鼠模型的构建
ONEstepCloneKit(Vazyme)将lentiCRISPRv2胶
回收
产物和
PCR产物
进行连接。连接产物转入E.coliDH5α大肠杆菌感受态,带氨苄青霉素的Luria-Bertani(LB)平板上筛选转化子,用引物lentiCRISPRv2-...
科研战神·王
2024-03-13 05:09
分子生物
请问
pcr产物
酶切后还需要胶
回收
吗?
pcr
出来的条带给胶
回收
了,其酶切位点在两端,请问能否直接酶切后就进行酶连啊,还需要再进行一次胶
回收
吗?
万润233
2024-02-29 01:06
生物科学
RNA的分离与纯化
对含量较低的样品,加入糖原可以提高RNA的
回收
率。总RNA提取法中...分子生物学、免疫,重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然
产物
Sh毕合生物
2024-02-06 07:27
分子生物
质粒提取纯化柱与
PCR产物
纯化柱是否可以混用?
会出现这个问题是由于实验室常用的质粒提取试剂盒和
PCR产物回收
试剂盒的纯化柱经常就少了。试剂盒一般buffer试剂会多给,纯化柱子是绝对不会多给的。这个问题先说答案,是可以的。纯化柱...
球场下雪了
2024-01-31 01:20
分子生物
较长基因的慢病毒过表达载体构建不成功
1.目的基因CDS区域长度2400bp,获得方法为使用带同源臂的引物从cDNA中扩增,退火温度为经过同模板,同反应体系不同温度验证的
产物
最亮的条带的温度,条...与marker比对位置正确,并切胶
回收
,...
tianyu1201
2024-01-19 07:46
生物科学
DNA提取试剂盒的工作原理和特点
而且,本制品经过了改良,热处理时间只需15分钟,使用本制品从实验开始至水相
回收
只需30分钟时间。得到的基因组DNA可以进行
PCR
扩增及限制酶处理等。公众号:毕合生物毕合生物('...
Sh毕合生物
2024-01-03 09:43
分子生物
PCR产物
可以不经纯化直接酶切吗
请问PCR产物可以不经过纯化直接用lambda核酸外切酶进行酶切得到ssDNA吗如果可以的话对PCR的MIX是否有要求呢Ps:因为实验室的
PCR产物回收
试剂盒适用于100bp以上的,我PCR产物是75bp的,之前...
干科研的
2024-01-03 07:27
生物科学
液相如何改善峰形与提高分离度!
秘诀3:粗调转微调RT-
PCR
是逆转录
PCR
,采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA,再以cDNA为模板进行
PCR
扩增,结果只能定性,不能定量。1.流动相的性质要求...⑥样品易于
回收
。...
科研小努力
2023-12-22 05:03
分子生物
最近连t和构建载体一直连接不上
我的基因是2000bp左右,胶
回收产物
浓度100多,加了a尾,使用takara的19-T连接,1载体,5solution1,4目的前片段,4度连接过夜,涂板每次都长的很好,菌检
pcr
也出现过条带,但是测序一直载体...
虾须镯
2023-12-03 12:21
分子生物
干货分享|液相如何改善峰形与提高分离度!
秘诀3:粗调转微调RT-
PCR
是逆转录
PCR
,采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA,再以cDNA为模板进行
PCR
扩增,结果只能定性,不能定量。1.流动相的性质要求...⑥样品易于
回收
。...
球场下雪了
2023-09-08 01:17
分子生物
干货分享|液相如何改善峰形与提高分离度!
秘诀3:粗调转微调RT-
PCR
是逆转录
PCR
,采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA,再以cDNA为模板进行
PCR
扩增,结果只能定性,不能定量。1.流动相的性质要求...⑥样品易于
回收
。...
MDL谭焕焕
2023-09-08 12:14
生物科学
一文了解引物的相关问题
但是犹如
PCR
扩增,不可能绝对保证扩增
产物
中没有突变,引物合成也不可能保证100%正确。...上样量都是非常大,电泳时的条带非常宽,带与带之间有重叠,分辨率已下降,电泳后割带
回收
目的引物时...
科研小努力
2023-08-14 06:21
分子生物
实验干货|分子克隆实验——无缝克隆
注意:以环状质粒为模板时,
PCR产物
需要使用DpnI等甲基化敏感型限制性内切酶对扩增产物进行处理,或对产物进行胶
回收
纯化。2.插入片段制备引物设计原则:通常使用PCR扩增的方法来获得目的...
李英华001
2023-07-28 01:05
生物科学
提取高质量的RNA!RNA提取实验操作步骤
不同组织总RNA提取的实质就是将细胞裂解,释放出RNA,并通过不同方式去除蛋白,DNA等杂质,最终获得高纯度RNA
产物
的过程。RNA提取的使用目的通过总RNA提取可...水相转移后,RNA通过异丙醇沉淀
回收
。...
28968058wj
2023-07-17 08:02
分子生物
经验分享|一文了解引物的相关问题
但是犹如
PCR
扩增,不可能绝对保证扩增
产物
中没有突变,引物合成也不可能保证100%正确。...上样量都是非常大,电泳时的条带非常宽,带与带之间有重叠,分辨率已下降,电泳后割带
回收
目的引物时...
球场下雪了
2023-06-15 03:26
硕博家园
电转大肠杆菌
想问下做电转化时,连接
产物
要纯化吗?如果要纯化,能不能用
PCR回收
试剂盒纯化呀,纯化完后浓度低怎么办
红色手套
2023-05-07 06:19
动植物
荧光素酶表达的淋巴瘤NCG小鼠模型的构建
ONEstepCloneKit(Vazyme)将lentiCRISPRv2胶
回收
产物和
PCR产物
进行连接。连接产物转入E.coliDH5α大肠杆菌感受态,带氨苄青霉素的Luria-Bertani(LB)平板上筛选转化子,用引物lentiCRISPRv2-...
球场下雪了
2023-04-04 02:13
分子生物
overlap
pcr
求助:做overlap,A基因634bp,B基因264bp,A+B基因扩出来全长应该在900bp左右,但是扩出来的条带只有750bp,...A和B均是用的胶
回收产物
去overlap,A的下游和B的上游有25bp重叠区,tm为58摄氏度
烟花为絮
2023-03-13 01:23
医学
荧光素酶表达的淋巴瘤NCG小鼠模型的构建
ONEstepCloneKit(Vazyme)将lentiCRISPRv2胶
回收
产物和
PCR产物
进行连接。连接产物转入E.coliDH5α大肠杆菌感受态,带氨苄青霉素的Luria-Bertani(LB)平板上筛选转化子,用引物lentiCRISPRv2-...
科研梦想
2023-01-11 08:52
生物科学
动物模型|荧光素酶表达的淋巴瘤NCG小鼠模型的构建
ONEstepCloneKit(Vazyme)将lentiCRISPRv2胶
回收
产物和
PCR产物
进行连接。连接产物转入E.coli?DH5α大肠杆菌感受态,带氨苄青霉素的Luria-Bertani(LB)平板上筛选转化子,用引物lentiCRISPRv2-...
晚风12351
2023-01-11 06:45
硕博家园
受GA3诱导的水稻伸长相关基因的分离与克隆
由于5‘端的随机引物对不同的mRNA结合位置的不同,扩增后的
产物
的大小也是不同的,在测序胶上则可明显分离开来,如果在
PCR
反应时...这些差异片段就是差别表达基因的cDNA,从胶上
回收
下这些cDNA...
jackyzfy
2022-08-21 02:46
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