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分类 共搜索到 18 个相关话题(最多显示前5000个) 作者 最后发表
考研 294调剂
本科期间,我的毕业论文题目是BnaUnng00860D基因在油菜干旱胁迫中的表达及过表达载体构建,在毕业论文的开展过程中,进一步熟悉了荧光定量PCR的操作以及参与了部分生理生化指标的...可以帮助我...
zhouli0516 2023-04-18 02:13
考研 294调剂
本科期间,我的毕业论文题目是BnaUnng00860D基因在油菜干旱胁迫中的表达及过表达载体构建,在毕业论文的开展过程中,进一步熟悉了荧光定量PCR的操作以及参与了部分生理生化指标的...可以帮助我...
zhouli0516 2023-04-17 01:30
分子生物 酶切完连接构建载体一直不成功
切入DNA片段1385bp,载体4729bp跑胶看亮度,片段大概10ng/ul,载体大概40ng/ul片段加了15ul,载体2ul,buffer2ul,T4连接酶1ul,摩尔比大概1:6.5。为什么一直连接不上呢?amp板上...求帮助!
Milkttttea 2022-08-07 03:42
分子生物 酶切连接构建载体一直连接不上
切入DNA片段1385bp,载体4729bp跑胶看亮度,片段大概10ng/ul,载体大概40ng/ul片段加了15ul,载体2ul,buffer2ul,T4连接酶1ul,摩尔比大概1:6.5。为什么一直连接不上呢?amp板上...求帮助!
Milkttttea 2022-08-07 03:48
分子生物 载体构建求帮助!
但是我根据载体序列在HindⅢ和NcoI上下游各加了200bp,加上我的目的片段应有500+bp的长度的带,这个一直都跑不出来,理论上连接成功是能跑出来的,实验重复了七八次了,包括提高引物浓度,...
WentworthM 2021-10-16 12:16
转基因 转基因载体构建求助!
各位大佬帮助!目前小弟在做转基因,我们有一个载体是带着GFP的,之前用这个载体做了亚细胞定位,在设计引物的时候是去掉终止子的,现在老师想让我再做下转基因,想问问各位大佬我这个...
xsksx 2021-09-24 01:20
第一性原理 不知道是基本得模型构建问题还是参数设置问题,求帮助!
想请问各位虫友有谁知道在MS中如何构建如下图所示得这种结构,就是在Au基体上负载得三个CoOOH这种结构,其中这三个CoOOH是要首先...我尝试过一个个从Au载体上画出原子,然后送去VASP里面计算,...
冰糖葫芦嘞 2020-02-24 11:59
硕博家园 pNZT1载体序列
pNZT1载体序列,最近在构建一株类芽孢杆菌突变株,了解到pNZT1是一个专门用来构建芽孢杆菌突变株的温敏型载体,正好手里有这个载体,但是苦于没有其完整序列,希望能够得到各位的帮助!...
圣狄比亚 2019-07-24 02:16
硕博家园 目的基因构建在pET20b中,但转入大肠BL21中不表达,求帮助
我是将一个目的基因片段(来自古生菌,蛋白分子量83kD)插入到pET-20b(+)的载体中,并在大肠BL21中表达,在构建的基因序列末端添加了His-tag标签(如上图),我将细胞破碎,离心的上清液...
ap372767129 2019-04-22 07:08
硕博家园 pHIS1522重组表达载体构建问题
本人目前正在构建pHIS1522表达载体,已经两周了,一直搞不出来。质粒和目的片段酶切都没问题,用的是SphI、AgeI。连接反应的比例是按照摩尔比1:10的。但是就是一直连不上,...大佬们帮助!
triwa 2018-11-23 01:17
分子生物 枯草芽孢杆菌芽孢基因Spo0A及上下游序列(3200bp)的测定问题
现在我要对这个菌做芽孢基因的敲除,因此我需要先得到这个菌的Spo0A及上下游序列(用来构建敲除载体),再来设计引物。所以,我先参照别人论文中的引物以及PCR条件进行,但是一直...求帮助!
我是VV07072 2017-04-19 09:12
分子生物 关于Cas9-sgRNA构建的困惑,质粒一直提不出来,向大家求助!
其中四个sgRNA很顺利就连进Cas9载体了,但是有两个靶点的sgRNA死活弄不出来,退火-连接-转化-挑斑-菌液PCR都没有问题(菌液PCR100%正确),然后我就抽提质粒送去测序。...求帮助,求指点!
乌托小邦 2016-08-03 01:34
生物科学 构建好的重组质粒,转染进入细胞,可检测到蛋白的表达,但蛋白不...
各位大神好,本人研三即将毕业,担心毕业论文,现在我的实验遇到一个完全做不下去的困难,...有没有同学和我一样的,构建载体,蛋白表达却不发挥作用的,请问你们是如何解决的,跪求帮助!
舒晋Jean 2016-03-04 03:38
分子生物 幼虫RNAi效果一直不佳,指点
本虫最近一直困扰于幼虫RNA干扰,无论是用试剂盒合成dsRNA还是通过构建载体进行体外合成dsRNA后饲喂,效果一直不好。看了别人的文献在同...小的实在是一团乱麻,跪大神们帮助呀,万分感谢
zljuile0713 2016-02-05 06:51
分子生物 植物表达载体pRI 101-AN的全序列!感激不尽!
构建植物表达载体用,想分析一下切割片段的大小。希望得到虫友的帮助!我就纳了闷儿了,为毛植物表达载体的那么多,可是没有一个在能找到详尽的序列或者使用说明呢?是要保密还是信息如此不...
不啻侠 2015-05-18 02:41
硕博家园 大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭质粒pHT43,急!急!急!
希望实现蛋白的分泌表达,先前自己在非分泌型的载体上pMA5加信号肽来实现分泌,结果没有实现表达,希望用分泌性表达载体pHT43来构建质粒,...谁手上有这种质粒的,希望能给予帮助,感激不尽!
zr511590075 2013-12-23 01:43