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分子生物
干货分享|PCR和凝胶电泳实验结果常见问题及原因分析
反应条件:
退火温度
太高,延伸时间太短。对策:纯化模板或者使用试剂盒提取模板DNA或加大模板的用量;更换Buffer或调整浓度;重新设计引物(避免链间二聚体和链内二级结构)或者换一管新...
科研实验_研实
2024-04-26 06:53
生物科学
超全教程|实时荧光定量PCR实验数据分析
(3)熔解曲线:Tm值,MeltingTemperature(解链温度),PCR双链产物的
退火温度
。这两个图是在荧光定量PCR结束后,对产物进行逐步升温时进行的监测,可以看到在达到其解链温度时,荧光信号...
科研战神·王
2024-04-26 01:40
医学
PCR实验,需要哪些组分/条件,值得收藏!
2.
退火温度
与实践
退火温度
决定PCR特异性与产量。温度高特异性强,但过高则引物不能与模板牢固结合,DNA扩增效率下降;温度低产量高,但过低可造成引物与模板错配,非特异性产物增加。合适的...
医学验证123
2024-04-19 05:31
分子生物
干货分享|PCR实验,需要哪些组分/条件,值得收藏!
2.
退火温度
与实践
退火温度
决定PCR特异性与产量。温度高特异性强,但过高则引物不能与模板牢固结合,DNA扩增效率下降;温度低产量高,但过低可造成引物与模板错配,非特异性产物增加。合适的...
科研顾问_Gu
2024-04-12 09:23
生物科学
PCR和凝胶电泳实验结果常见问题及原因分析
反应条件:
退火温度
太高,延伸时间太短。对策:纯化模板或者使用试剂盒提取模板DNA或加大模板的用量;更换Buffer或调整浓度;重新设计引物(避免链间二聚体和链内二级结构)或者换一管新...
基础生物实验外
2024-04-10 12:42
生物科学
分子克隆的菌液PCR出现很多杂带
载体是pcdh,用的是通用引物,目的条带大概2100,5000的marker,再下分别是3000,2000,1500出现了很多杂带,是
退火温度
(62)太低了吗,还是菌摇的时间太长,求各位大佬帮忙看看
一只呆鼠
2024-04-03 06:35
分子生物
PCR检测技术操作步骤
引物与靶DNA
退火
,适当降低
温度
,使两个引物分别结合成靶DNA两条的3′末端向5′末端延伸。引物延伸,在DNA聚合酶的催化下,引物沿着靶DNA3′末端向5′末端延伸。新合成的DNA链在变性解离后...
科研战神·王
2024-04-01 02:14
生物科学
PCR和凝胶电泳实验结果常见问题及原因分析
反应条件:
退火温度
太高,延伸时间太短。对策:纯化模板或者使用试剂盒提取模板DNA或加大模板的用量;更换Buffer或调整浓度;重新设计引物(避免链间二聚体和链内二级结构)或者换一管新...
科研战神·王
2024-03-29 01:33
微米和纳米
金膜
退火
后是扁球,不能呈圆形
求助:对镀金结构进行退火,
退火温度
都已经到900℃了,还是不能得到圆的金球,直径在100nm左右的高度只能达到7nm,怎么解决求路过的大佬出出主意
小小小晓旭
2024-03-21 02:05
分子生物
PCR检测技术操作步骤
引物与靶DNA
退火
,适当降低
温度
,使两个引物分别结合成靶DNA两条的3′末端向5′末端延伸。引物延伸,在DNA聚合酶的催化下,引物沿着靶DNA3′末端向5′末端延伸。新合成的DNA链在变性解离后...
科研战神·王
2024-03-12 02:01
分子生物
PCR检测技术操作步骤
引物与靶DNA
退火
,适当降低
温度
,使两个引物分别结合成靶DNA两条的3′末端向5′末端延伸。引物延伸,在DNA聚合酶的催化下,引物沿着靶DNA3′末端向5′末端延伸。新合成的DNA链在变性解离后...
科研战神·王
2024-03-11 05:11
生物科学
引物设计与验证的注意事项
2、两个引物
退火温度
差不多;3、每个引物的GC含量不要太高或太低;4、引物最好没有回文序列;就这4点就很好了。如果还是满足不了!只要前2点就够了。二、荧光定量引物的特定要求做荧光定量...
科研狗的日常吖
2024-03-07 10:26
医学
实验技巧|RNA-FISH不难,和小助手一起拨开云雾见月明
如果待检测的细胞或组织切片上的靶核酸与所用的核酸探针是同源互补的,二者经变性-
退火
-复性,即可形成靶核酸与核酸探针的杂交体...(6)杂交1小时,所用
温度
与预杂交
温度
相同,每张切片用100-...
科研虫子小助手
2024-03-07 09:57
生物科学
干货分享|PCR、qPCR、RT-PCR、RT-qPCR、Real-Time PCR的区别
②模板DNA与引物的
退火
(复性):将
温度
降至55℃左右时,引物与模板DNA单链按碱基互补配对的原则结合;③引物的延伸:再将
温度
调至72℃左右(DNA聚合酶最适反应
温度
),DNA模板和引物结合物...
MDL医学实验
2024-02-21 01:15
微生物
常用PCR技术及原理
在降落PCR中,前几个循环的
退火温度
设定为,比引物的最高
退火温度
(Tm)再高几度。较高的
退火温度
能有效减少非特异性扩增,但同时较高的
退火温度
会加剧引物与目标序列的分离,导致PCR的产量...
MDL医学实验
2024-02-19 08:19
生物科学
质粒提取的小技巧
(4)
退火温度
(45~65度);(5)引物长度(18~27bp);(6)3'端最好是C、G(提高结合度);(7)引物在序列中的错配位点;大致就这几个方面,重要性依次降低,由其是3'端绝对不能形成发夹结构。那么你说你...
Sh毕合生物
2024-01-25 12:04
分子生物
较长基因的慢病毒过表达载体构建不成功
1.目的基因CDS区域长度2400bp,获得方法为使用带同源臂的引物从cDNA中扩增,
退火温度
为经过同模板,同反应体系不同温度验证的产物最亮的条带的温度,条带位置在2000-3000之间,大致位置是没...
tianyu1201
2024-01-19 07:46
分子生物
引物设计与验证的注意事项
2、两个引物
退火温度
差不多;3、每个引物的GC含量不要太高或太低;4、引物最好没有回文序列;就这4点就很好了。如果还是满足不了!只要前2点就够了。二、荧光定量引物的特定要求做荧光定量...
球场下雪了
2024-01-15 01:38
生物科学
假阳性?条带不对?菌液PCR问题一网打尽!
(2)Mg2+离子浓度过高、
退火温度
过低,PCR循环次数过多。(3)酶量过多或酶的质量差。(4)菌落污染。5.平板长菌,挑的单克隆菌落能摇起来,菌液PCR也有目的条带,但测序无信号?产生原因...
球场下雪了
2024-01-04 02:34
金属
需要做纯钽的电解抛光,用来做EBSD,观察晶粒组织
10×10mm,致密的有小圆片10×2mm,小方块10×10×10mm和5×5×5mm的,都是激光3D打印成型的,里面包含不同
温度
的
退火
件,有可以做的可以私信我或者加我v15954076265,细聊。
wjx十三
2023-12-27 11:08
无机非金属
钛酸钡基PTC陶瓷的制备流程求助
想请问一下各位大神,我们是按以下流程烧制的钛酸钡基陶瓷,期望具有PTC性能,但是在测室温...
退火温度
为650℃,时间为30min。最后将陶瓷片侧面的电极用砂纸打磨掉以免影响电学性能的测试。
空心荡
2023-12-17 08:04
功能材料
上海交大钱小石教授课题组在Science发表研究论文,实现铁电...
弹性中子散射结果显示未
退火
前TPD-un的均方位移最小,表明氢离子被紧密...TPD巨电卡效应在室温附近具有良好的
温度
稳定性,可以覆盖10℃到70℃的有效
温度
窗口,因此可以得到最大的RC制冷能力。...
bush286
2023-12-05 01:39
分子模拟
lammps混合MD/MC
退火
在尝试使用混合MD/MC中,试图在升温/降温过程中使用SGCMC的atom/swap命令,但该命令中的
温度
是确定值,该如何解决?
m小咸鱼
2023-12-04 07:36
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