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分类	共搜索到 134 个相关话题(最多显示前5000个)	作者	最后发表

分子生物	基因敲除的原理与方法利用基因同源重组进行基因敲除基因敲除是80年代后半期应用DNA同源重组原理发展起来的。80年代初，胚胎干细胞(ES细胞)...②可避免因基因突变而致死胎的问题③在2个loxP位点之间的重组率较高;...	科研战神·王	2024-04-03 03:16
微生物	基因敲除实验求助基因敲除实验求助，本人正在做假单胞菌株基因的敲除，利用同源重组的原理构建了上下游同源臂，载体为自杀质粒含SacB基因对蔗糖...还有一个问题得到单交换菌株后，用无抗性液体培养后稀释1000...	小鸡腿a	2024-03-31 12:31
分子生物	基因敲除的原理与方法利用基因同源重组进行基因敲除基因敲除是80年代后半期应用DNA同源重组原理发展起来的。80年代初，胚胎干细胞(ES细胞)...②可避免因基因突变而致死胎的问题③在2个loxP位点之间的重组率较高;...	科研战神·王	2024-03-14 07:59
药学	临床新兴抗肿瘤治疗方法发展概述为了维持基因组的完整性，肿瘤细胞中存在多种DNA损伤修复机制，以DNA双链断裂和单链断裂为例，前者修复机制主要包括同源重组和非同源末端...但是多肽类药物也存在易降解、细胞穿透性低等问题，...	专注多肽	2023-09-12 01:43
分子生物	沙门氏菌基因敲除求大佬指导！想敲除肠炎野生株1000bp左右的基因，...诱导的时候菌摇到OD0.4-0.6，加了100mM的IPTG诱导T5启动子进行同源重组修复1h，加1M的L-阿拉伯糖诱导cas9蛋白切割基因组，最后涂抗性和阿拉伯糖平板，...	GracyGao	2023-05-12 03:11
生物科学	2022肺癌靶标热点追击，ERRα/LTK/EMSY初露锋芒作者通过基因敲除KEAP1，发现EMSY会累积，并开始抑制细胞基因同源重组修复和干扰素I型免疫应答，促使肺癌细胞免疫逃逸。...源井生物可以像文章中研究一样，根据客户需求定点敲除基因（如KEAP1...	我太秀了	2023-04-18 02:40
分子生物	综述：赤拟谷盗：精心设计遗传工具包和随机大规模 RNAi 筛选以... 因此，通常利用在果蝇中已被充分研究的基因作为直系同源物，在甲虫发育过程中进行宏观进化比较，例如轴形成、身体分割和附肢、...主力技术：稳健和系统性的RNA干扰通过RNAi进行基因敲除是一种...	guying03	2022-08-03 02:24
微生物	求助，用CRISPR-Cas9一直敲不掉鲍曼的基因比如cas表达基因、RecAb重组酶表达基因、gRNA和供体片段，...是文章里写成果经过供体同源重组的话能产生一百多个菌落，但是我们的试验好几次都只有不到100个菌落，而且和两个对照（不把供体...	Squama	2022-05-25 06:37
生物科学	细菌同源重组双交换问题。我用的pDM4同源重组对细菌进行基因敲除。接合后用双抗平板筛出单交换菌株。然后20%蔗糖LB液体里面培养12小时后在20%蔗糖LB平板上划线，长出来的菌在氯霉素平板上也能长。这样一直筛不到...	Ffffword	2022-03-31 02:59
硕博家园	含有抗性基因的线性片段电转化感受态细胞哪位大神可以解答我的问题？万分感谢！我做的巴氏醋酸菌的同源重组的方法进行基因敲除，可是实验结果一直不理想。我通过电击感受态将含有抗性DNA片段转化醋酸菌中，理论上在抗性平板上含有...	四维星空	2022-03-21 01:43
硕博家园	含有抗性基因的线性片段电转化感受态细胞哪位大神可以解答我的问题？万分感谢！我做的巴氏醋酸菌的同源重组的方法进行基因敲除，可是实验结果一直不理想。我通过电击感受态将含有抗性DNA片段转化醋酸菌中，理论上在抗性平板上含有...	四维星空	2022-03-21 01:42
硕博家园	同源重组的基因敲除同源重组的方法进行基因敲除，三亲结合后最后一步用10%蔗糖筛选时总是回去野生型，试过很多次都没成功，太难了叭。请问大伙如何解决这个问题的吖，诚心请教经验，谢谢～	忘忧碎蓝	2021-11-12 01:11
分子生物	pkD46敲除Red重组，出来的单菌落杂合，pCR结果显示既有敲除打靶... pkD46敲除Red重组，出来的单菌落杂合，pCR结果显示既有敲除打靶片段又有原片段打靶片段是PCR产物，上同源臂200bp+下同源臂200bp+...原有要敲得基因在，敲上去的打靶片段也在，而且送去测序了，...	张小蛋	2021-09-07 12:04
分子生物	肺克基因敲除问题本人采用red重组敲除，目的片段750bp左右，先电转入含四环素抗性的pKD46质粒，然后用阿拉伯糖诱导重组酶表达后制作成感受态，电击转化入重组片段（含上下游同源臂各250bp，卡那霉素抗性基因...	garakutadoll	2021-09-03 04:15
招聘信息布告栏	研发工程师/科学家多岗位诚聘，合成生物学领域初创公司 Delonix... 菌株工程师（分子生物学）strainengineer(molecularbiology)职责：?复杂质粒的设计和快速构建?针对细菌进行基因敲除、基因敲入...能够自主设计基因组操作的方案，并高效执行?熟悉同源重组、...	426290645	2021-05-19 09:21
分子生物	分子小白！求助现在需要敲除酵母的一个基因，同源重组的方法。问题1.必须用质粒敲吗？可以用片段来敲吗？2.想做这个基因上下游的引物，我要怎么才能找到这个基因上下游的序列呢？感激感激！	abcdeojg	2021-05-19 08:34
招聘信息布告栏	【研发工程师职位】合成生物学领域公司 Delonix Bioworks 人才... 菌株工程师（分子生物学）strainengineer(molecularbiology)职责：?复杂质粒的设计和快速构建?针对细菌进行基因敲除、基因敲入...能够自主设计基因组操作的方案，并高效执行?熟悉同源重组、...	DelonixBio	2021-04-21 06:05
硕博家园	药用真菌利用同源重组敲除基因的问题目前我打算使用同源重组的方法进行基因敲除，有几个问题不是很懂，向各位请教：1.不同物种同源臂的长度不同对重组率有影响，为了尽量提高重组率，我两个同源臂都选了2000bp是否合适？过长...	霍进喜	2021-01-06 07:17
分子生物	体内转染试剂对大脑转染的应用及比较基因敲除动物基因敲除动物是通过DNA同源重组或基因的插入突变和iRNA原理制备，或通过诱导剂诱导获得。基因敲除动物可以实现基因的完全敲除，条件性基因敲除，基因定点插入，点突变研究，人...	engreen2016	2020-03-11 01:17
分子生物	Red同源重组，大肠杆菌EDL933同源重组效率低是什么原因啊？萌新最近开始做Red同源重组来敲除大肠杆菌O157(EDL933)中的一个基因，我用的是pKD4pKD46pCP20这三个质粒，从DH5a中提取出来就PCR验证了，证明质粒没有问题，现在已经得到了pKD46/O157重组子...	寒冬夜寂	2019-12-03 01:27
分子生物	使用JQ200SK自杀质粒敲除BL21(DE3)基因组基因的问题想采用自杀性质粒pJQ200SK来做基因敲除，宿主细胞是BL21(DE3)，请问在敲除过程中，需要先使用pKD46诱导重组酶么？还是直接把带同源序列的目的基因用pJQ200SK直接转化BL21(DE3)...	songxiawu	2019-11-25 02:01
分子生物	动物体内转染实验研究基因敲除动物基因敲除动物是通过DNA同源重组或基因的插入突变和RNAi原理制备，或通过诱导剂诱导获得。基因敲除动物可以实现基因的完全敲除，条件性基因敲除，基因定点插入，点突变研究，人...	人间芳菲	2019-06-27 08:04
分子生物	【干货】倚天屠龙，谁与争锋——且看基因敲除与RNA干扰的关系首次证实的哺乳动物细胞中同源重组...一起来回顾历史哦~图2.'http://www.sohu.com/a/284394775_704327[7]'crispr/cas9基因敲除基因敲除(knockout)是指利用遗传工程技术，针对某个特定已知基因...	百奥赛图	2019-06-27 05:09
分子生物	敲除基因同源重组问题都是采用同源重组的方法，敲除的方法是同源臂-启动子-抗性基因CDS-终止子-下游同源臂。但是同源臂和启动子、终止子序列都是从基因组上PCR扩增的，采用电转化的方法将DNA片段转入酵母中，...	burma9	2019-03-15 02:14
分子生物	基因敲除的方法及其区别大家好，我是刚进行自己的实验，遇到了问题想要向各位请请教...然而我试验中需要敲除基因的C末端（仅有4-5个氨基酸残基），我们实验室和知网的硕博士论文中普遍用的是同源重组法进行敲除，我想...	黄金伏地魔	2019-03-11 01:10