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作者
最后发表
分子生物
质粒
提取纯化柱
与PCR
产物纯化柱是否可以混用?
如果细菌的浓度比较高,那么在溶菌时,溶
菌液
很难和细菌液充分混合,导致溶菌不彻底的问题,这样会造成
质粒
的回收率比较低;在生物学的相关研究之中,...2
质粒
纯化柱
与PCR
产物纯化柱可否混用?...
球场下雪了
2024-01-31 01:20
分子生物
较长基因的慢病毒过表达载体构建不成功
菌液PCR
,绝大部分菌落均呈现阴性(大于80%),将阳性菌落送测序,结果均显示失败,问其失败原因,公司回复说,
质粒
条带出现在4000多的位置,
与
预期不符。依据其返回的失败测序文件看,有的...
tianyu1201
2024-01-19 07:46
生物科学
假阳性?条带不对?
菌液PCR
问题一网打尽!
重新提
质粒
,重新转化。2.平板长菌,挑的单克隆菌落能摇起来,但菌液PCR没有条带?产生原因及解决办法:(1)重组或...3.平板长菌,挑的单克隆菌落能摇起来,但
菌液PCR与
阳性对照的大小不对?...
球场下雪了
2024-01-04 02:34
生物科学
手把手教你做“蛋白纯化”
步骤:1、构建原核表达
质粒
:目的基因
PCR
,载体酶切,连接,转化,挑单克隆送测序;...根据结果进行后续操作:若洗脱蛋白样品中蛋白无杂带或杂带少且浅,可进行透析
与
浓缩,若杂带多则需要再次...
科研小努力
2023-08-23 05:07
生物科学
蛋白纯化的步骤
1、构建原核表达
质粒
:目的基因
PCR
,载体酶切,连接,转化,挑单克隆送测序;...根据结果进行后续操作:若洗脱蛋白样品中蛋白无杂带或杂带少且浅,可进行透析
与
浓缩,若杂带多则需要再次纯化后...
科研小努力
2023-08-15 05:23
生物科学
干货分享|手把手教你做“蛋白纯化”
脱色液仪器:Ni-NTA、超声破碎仪、层析柱、浓缩管步骤1、构建原核表达
质粒
:目的基因
PCR
,载体酶切,连接,转化,挑单克隆送...4、找到最适诱导条件后,将
菌液
1:1000接种到2L的LB中,37℃摇...
李英华001
2023-08-08 06:07
分子生物
手把手教你做“蛋白纯化”
脱色液仪器:Ni-NTA、超声破碎仪、层析柱、浓缩管步骤1、构建原核表达
质粒
:目的基因
PCR
,载体酶切,连接,转化,挑单克隆送...4、找到最适诱导条件后,将
菌液
1:1000接种到2L的LB中,37℃摇...
球场下雪了
2023-08-08 02:38
分子生物
实验干货|分子克隆实验——无缝克隆
目的片段
PCR
引物包括:载体
与
插入片段连接处引物、插入片段
与
片段连接处引物。...3.以
质粒
为模板进行插入片段
PCR
扩增时,若后续使用DpnI消化处理,应在反应完成后失活DpnI,以免降解重组载体。...
李英华001
2023-07-28 01:05
分子生物
基础科研|酵母双(单)杂交cDNA文库构建
1.9初级文库铺板,抽提
质粒
1.10初级文库
质粒与
PDEST22(或者...3.发货内容3.1我们提供构建好的酵母文库的甘油
菌液
(含20%甘油的LB培养基),扩增后初级文库甘油菌,初级文库中抽
质粒
,随机克隆子的
PCR
...
987293587
2022-08-25 07:45
休闲灌水
最常用的生物实验技术及原理
4、吸取1.5mL培养好的
菌液
至1.5mL离心管中,在冰上冷却10分钟;5、4℃下3000g冷冻离心5分钟;...碱变性提取质粒DNA碱变性提取质粒DNA是基于染色体DNA
与质粒
DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。...
略施小计
2022-08-05 08:05
休闲灌水
最常用的生物实验技术及原理
4、吸取1.5mL培养好的
菌液
至1.5mL离心管中,在冰上冷却10分钟;5、4℃下3000g冷冻离心5分钟;...碱变性提取质粒DNA碱变性提取质粒DNA是基于染色体DNA
与质粒
DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。...
略施小计
2022-07-11 04:30
分子生物
TA克隆
质粒
测序
但
菌液
和通用引物
pcr
产物分别送公司测序后结果
与
EGFP和T载体完全比对不上。测序结果ncbi上blast后发现是其他克隆载体的新霉素抗性基因,但挑了蓝色阴性菌落提
质粒
送测序结果和T载体能比对上...
xiko5574
2022-06-18 01:12
分子生物
基因工程,构建表达
质粒
请问大佬们,构建表达
质粒
时,为验证目的片段
与
载体是否连接上,用NEB的T4连接酶连接后做了转化、
菌液PCR
可以扩出目的大小条带,提
质粒
后仍用NEB的酶做双酶切(50μl体系),
质粒
1μg定量,...
树下的apple
2022-05-25 01:11
考研
工科生物
与
医药考生求调剂!
考研详细情况:大四应届研考生,一志愿云南大学生物
与
医药专...包括基因克隆构建、RT-
PCR
实验、基因组DNA提取以及DNA数据分析等,能熟练进行细菌
菌液
培养、
质粒
提娶
PCR
纯化、DNA样品切胶回收等...
用户184
2022-03-28 07:25
考研
生物
与
医药288求调剂
考研详细情况:大四应届研考生,一志愿云南大学生物
与
医药专...包括基因克隆构建、RT-
PCR
实验、基因组DNA提取以及DNA数据分析等,能熟练进行细菌
菌液
培养、
质粒
提娶
PCR
纯化、DNA样品切胶回收等...
用户184
2022-03-12 04:23
考研
求调剂
考研详细情况:大四应届研考生,一志愿云南大学生物
与
医药专...包括基因克隆构建、RT-
PCR
实验、基因组DNA提取以及DNA数据分析等,能熟练进行细菌
菌液
培养、
质粒
提娶
PCR
纯化、DNA样品切胶回收等...
用户184
2022-03-11 06:50
分子生物
PCR
实验最常见的9个问题及解决方案
接种大摇后无条带(1)可重新以菌落和
菌液
为模板...如果仍出现上述结果,推测可能是平板上连接液中的未连接载体的扩增引起的目的条带,进一步
质粒PCR
检测,可证明目的片段是否真正连接成功。
aypg6826
2021-12-15 06:59
微生物
质粒
提取及原理这些你都知道吗
在
质粒
DNA的应用过程中,其纯度对于酶切、
PCR
扩增等实验结果有着比较大的影响,因此需要保证
质粒
DNA提取的纯度和效率。...使染色体DNA和
质粒
DNA变性,为下一步
质粒
DNA的复性及
与
染色体DNA分离...
北京艾柏森
2021-11-08 01:27
微生物
质粒
提取鉴定及保存
11)
质粒
或
PCR
产物纯化(胶回收)(1)琼脂糖电泳酶切或
PCR
相关产物。...以抗体药物研发一条链解决方案为基础,我们主要为客户提供重组蛋白表达生产、抗体制备、噬菌体库构建
与
筛选,单克隆...
北京艾柏森
2021-09-06 02:58
招聘信息布告栏
精准生物招聘生物医药相关岗位啦
负责T克隆,
质粒
,
菌液
,
PCR
产物的基因测序;...负责部门蛋白表达生产相关的一至多项技术支持工作(细胞株/菌株的构建
与
培养,蛋白的纯化
与
制剂,蛋白浓度/纯度/分子量/生物学活性检测等);...
chenjunustb
2021-09-01 02:40
分子生物
重组
质粒
挑取单克隆后
菌液pcr
没有条带,求助大神可能是什么原因...
但是
菌液pcr
就是跑不出条带,一个模糊的条带都没有,求助各位大神是哪里出了问题,如果是空载自连的话,我挑的12个菌都没有条带,而且我连接目的基因
与
载体的摩尔比是10:1,感觉不太可能。...
是火龙果呀
2021-07-29 12:31
分子生物
农杆菌转化
我是讲载体
与
目的基因酶切后链接转入大肠杆菌感受态细胞中,摇菌提
质粒
后双酶切验证条带也没问题,用验证过的
质粒
采用冻融法转EH105农杆菌,在含卡娜和利福平的平板上培养,长单菌落,挑完...
求学。
2020-07-13 02:08
分子生物
梳理|DNA提取那点事儿
质粒
dna
质粒
(plasmid)是一类存在于细菌和真菌细胞中独立于...容易和核酸共沉淀而
与
dna结合成粘稠的胶状物,影响了dna的质量和纯度,不能被限制性内切酶酶切,严重的甚至不能作为模板进行
pcr
...
anfen2366
2019-06-14 06:29
分子生物
菌液PCR与质粒PCR
各位大佬在下做的是将构建好的质粒转入到大肠杆菌DH5α中扩增结果就是挑菌摇菌之后用
菌液
为模板做PCR结果都没有但是把该
菌液
用试剂盒提取质粒之后用
质粒PCR
鉴定有目的条带大小也正确让在下...
童剑军
2019-03-16 01:08
微生物
在大肠杆菌中表达小鼠造血干细胞因子的研究
用BamHI和Xhol将mSCFcDNA从pGEM-T-SCF内切出并克隆入pGEX-4T-3内谷胱甘肽转移酶(GST)基因的下游成表达
质粒
pGEX-4T-3-SCF,将pGEX-4T-3-SCF转化大肠...
菌液
,细菌经超声破碎后离心取上清,通过...
medicilon
2018-09-21 05:16
102
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